动物实验中的基本技术和方法.pptxVIP

? 第一节实验动物的抓取与固定 抓取与固定是动物实验的一项基本技术，其目的是使动物保持在安静的状态下，顺利地进行各项实验。同种动物不同实验目的、实验内容，抓取与固定方法也可以不同。 一、小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒+面罩1套。 方法步骤： 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养合的面罩上。 2、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后及 颈背部的皮肤，将小鼠提起。 3、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹 小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条 直线。 4、用左手无名指 压住小鼠背部的 皮肤，小指压住 小鼠的尾巴根部。 5、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。 此法适用于肌注、腹腔注射、灌胃等 2、固定板（器）固定 （1）将小鼠麻醉后，用细绳捆住小鼠四肢。 （2）准备一个15-20cm，边缘钉有5个钉子 的方木板。 （3）将四肢用细绳固定在木版两侧的钉子 上，在上颚切 齿处用细绳 固定在木版前方的钉子上。 固定板固定适用于大多数动物手术。 小鼠固定器适用于尾静脉注射。二、大鼠和地鼠（一）抓取 1、 周龄较小的大鼠和地鼠，可以像小鼠一样抓住尾部提起。 2、周龄较大的大鼠可张开左手虎口，迅速将拇、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身体中段，并将其保持仰卧位，然后调整左手拇指的位置，紧抵在下颌骨上即可进行实验操作 。注意： 操作者第一次抓取大鼠时，最好戴防护手套；不能捉提尾尖，也不能长时间将大鼠悬在空中。 （二）固定1、徒手固定：对体重较小的大鼠可用拇指、食指捏住大鼠耳部及颈部皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心，调整好大鼠在手中的姿势即可进行实验操作。如：灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等实验 。2、固定板固定：方法与小鼠固定板固定相同， 只是需选择更大一些的固定板。3、?固定器（盒）固定：方法与小鼠固定器（盒） 固定相同，只是固定器较小鼠的大。同样适用 于大鼠尾静脉注射。 三、豚鼠（一）抓取 抓取幼龄豚鼠时，用两手捧起；成熟豚鼠可以用左手大把抓起。 注意： 豚鼠性情温和，但胆小易惊，易造成自伤。抓取时，不能太粗野，更不能抓腰腹部，在操作过程中，如果豚鼠挣扎，手不要越握越紧，否则会造成豚鼠呼吸困难，甚至死亡。 （二）固定1、徒手固定：用左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧，拇指和无名指放在肋部，分别用手指挟住左右前肢抓起，然后反转左手，用右手的拇指和无名指挟住右后肢，用中指和无名指挟住左后肢，使鼠体成为一条直线。2、固定板（器）固定：与大、小鼠，豚鼠固定板固定基本一致。 四、兔的抓取保定：(一) 方法1：步骤： 1、用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤，轻轻把兔提起。 2、用左手托住兔的臀部。 (二) 方法2：器材：兔保定架1个。步骤：1、打开保定架的上盖，抓取并将兔放进架内，迅速关上保定架的上盖。2、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡栓，将兔的脖子保定。3、如果兔挣扎，可用手在它的背上轻轻抚摸，使其安静。 注意： 家兔温顺，一般不会咬人，但脚爪较锐利，要防止被抓伤。另外抓取时不能只提兔耳或四肢，也不能用单手只抓颈背部皮肤。 五、实验犬（一）抓取可用特制的长柄铁钳夹住犬的颈部，由另一人用布带或粗绳缚其嘴，并将布带、绳固定在狗耳后颈部，防止脱落 。注意： 狗性情凶恶、咬人，避免被其咬伤。在缚嘴时，动作要迅速，捆绑松紧要适中。 （二）固定 实验台固定：用特制的长柄铁钳夹住犬的颈部后，麻醉动物。将麻醉的犬放在实验台上，再用粗棉带（绳）固定四肢于实验台上。并将犬舌拉出。此固定方法仰卧位适用于口腔、颈、胸、腹、四肢等部位的实验，俯卧位适用于脑、背部位的实验。 三、实验动物编号与标记方法（一）染色法： 1、单色涂染法：在每组动物不超过l0只或一个实验不超过40只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂：3-5％苦味酸溶液，可染成黄色②2%硝酸银溶液，涂染成咖啡色（涂后需光照10min）；③0.5%中性红或品红溶液，涂染成红色；④煤焦油酒精溶液，涂染成黑色；⑤龙胆紫溶液，涂染成紫色 方法步骤： (1)涂染原则：从左到右、从上到下。 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3号。 (3)两耳后部4号、背中部5号、 后肢背部6号。 (4)右前肢7号、 右侧腹部8号、 右后肢9号。 (5)尾巴根为10号。（6）额部为20号 2、双色涂染法： 在每组动物不超过100只的情况下 适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂： (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。——作为“十”位数。 方法步骤： (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数，个位数的染色标记方法同单色涂