第五章 微生物的新陈代谢.PPT

●逆向TCA循环（绿菌属） （柠檬酸裂合酶） 二、生物固氮 大气中的分子氮通过微生物固氮酶的催化而还原成氨的过程。 生物固氮：130×106吨 工业固氮：50×106吨 （一）固氮微生物 1.自生固氮菌（Aztobacteria） ●蓝藻 2.共生固氮菌 （豆科植物）Rhizobium （非豆科植物） 3.联合固氮 必须生长在植物根际、叶面或动物肠道等处才能进行固氮的微生物。 ●Frankia ●Azotospirillium 二、固氮的生化机制 N2+8[H]+18~24ATP→2NH3+H2+18-24ADP+18~24Pi 1.生物固氮要素 ●ATP (1:18) ●还原力和传递载体 ：NADPH Fd、Fld ●还原底物（N2） ●Mg++ ●厌氧微环境 ●固氮酶 ●FeMoCo(固氮酶活性中心） ●固氮酶生物特性 ---还原N2、H+、C2H2等生物活性 ---由固氮酶（组分I；铁钼蛋白；固二氮酶）和固氮酶还原酶（组分II；铁蛋白；固二氮酶还原酶）共同组成时才具有生物活性 ---氧不可逆失活作用 2.活力测定—乙炔还原法 3 固氮的生化途径 N2+8[H]+18~24ATP→2NH3+H2+18-24ADP+18~24Pi ●氨的去路 4.固氮酶的产氢反应（2H+→H2） 固氮酶 2H+ ---------------------→H2 氢化酶 （三）固氮酶避氧机制 1.好气性自生固氮菌： ----呼吸保护 ----构象保护 2.蓝藻： ----还原性异形胞 ----其它 （2）硫酸盐呼吸 在无氧条件下，某些厌氧微生物无氧呼吸时利用硫酸盐为氢受体还原为H2S 并获取能量的过程。 特点：底物脱氢后，经呼吸链递氢，最终由末端氢受体硫酸盐受氢，在递氢过程中与氧化磷酸化作用相偶联而获得ATP. 最终产物是H2S。 总结： ●无氧呼吸是厌氧和兼性微生物的一种产能反应，不同于好氧呼吸，底物脱下的氢经呼吸链传递给无机氧化物或有机氧化物；产能较少。 ●硝酸盐异化还原是兼性微生物进行的无氧呼吸，为硝酸盐还原为亚硝酸或氮气的过程。 ●自然界中进行无氧呼吸的主要方式还包括硫呼吸、铁呼吸等。 （3）发酵 广义发酵：利用微生物生产有用代谢产物的一类生产方式。 狭义发酵：在无氧条件下，底物脱下 的氢未经呼吸链而直接交给某一内源性中间代谢物，以实现底物水平磷酸化的生物氧化反应。 底物水平磷酸化 发酵中的产能反应：发酵仅是专性厌氧菌或兼性厌氧菌在无氧条件下的一种生物氧化形式，其产能机制都是底物水平的磷酸化反应，因而产能效率极低。 底物水平磷酸化可形成多种含高能磷酸键的产物如磷酸烯醇式丙酮酸、1,3－二磷酸甘油酸等，在厌氧发酵过程中，很多反应可形成乙酰磷酸，乙酰磷酸经乙酸激酶的催化，就能完成底物水平磷酸化产能。 ■由EMP途径中丙酮酸出发的发酵 丙酮酸是EMP途径的关键产物，由它出发，在不同微生物中可进入不同发酵途径。 V.P.试验：某些微生物利用丙酮酸产生乙酰甲基甲醇，在碱性条件下脱氢形成二乙酰，与胍基化合物产生红色反应，可用于某些细菌的鉴定。 ■通过HMP途径的发酵 ◆异型乳酸发酵：凡葡萄糖经发酵后除主要产生乳酸外，还产生乙醇、乙酸和CO2等多种产物的发酵。 A.异型乳酸发酵经典途径 B.异型乳酸发酵的双歧杆菌途径 ■通过ED途径的发酵（细菌酒精发酵） ■氨基酸发酵产能（Stickland反应) 以一种氨基酸作底物脱氢（即氢供体），而以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型，称为Stickland反应。 反应式：丙氨酸+2甘氨酸 ? 3乙酸+ATP 总结： ●发酵为厌氧或兼性微生物在无氧下的底物水平磷酸化的产能反应； ●主要途径包括经EMP、HMP、ED途径和Stickland反应的发酵；如经EMP的6条发酵途径、VP反应；HMP的异型乳酸发酵；氨基酸氧化与还原偶联的发酵 ●发酵具有重要的生物学意义及在微生物学实践中的应用价值。 二、自养微生物产ATP和产还原力 自养微生物与异养微生物在生物化学合成能力上的根本区别： ◆自养微生物的生物合成起点是建立在对氧化程度极高的CO2进行还原的基础上，异养微生物则是建立在对氧化还原水平适中的有机碳源直接利用的基础上