《小鼠骨髓染色体制备及观察》.pptVIP

实验三 小白鼠骨髓染色体制备及观察;2、实验原理;3、实验材料;3、实验材料;3、实验材料;4、实验方法;方法与步骤;腹腔内注射秋水仙素3~4小时后，断头处死小鼠。;取出小鼠的后肢骨，注意不要将股骨剪断，否则容易造成骨髓细胞的流失。;滴加适量生理盐水进行冲洗，并仔细地将皮肤、肌肉等组织清除干净。;加入适量低渗液，用剪刀将骨充分剪碎，并用吸管吹打，使骨髓细胞全部释放出来。;将获得的液体收集到离心管中，离心后去上清液，加低渗液至8ml左右，室温下静置20~30分钟，进行低渗。低渗结束后，加入1ml左右的Carnoy’s固定液进行预固定，轻轻混匀后，离心。;1000转/分，离心10分钟，弃上清，加入固定液，混匀后，室温放置25分钟，再次离心去上清，重复固定一次，离心后，向沉淀中加入1ml固定液，将细胞重悬。;;滴片后，将片子晾干，滴加适量Giemsa染液染色10~15分钟，弃去染液，水洗，镜检。;实验结果;结果显示;5、实验结果与分析讨论; 使用柠檬酸钠的原因： 在临床上采取新鲜血液时,需要加入一些消毒过的柠檬酸钠,就能起到防止血液凝固的作用,所以柠檬酸钠被称为抗凝血剂。 枸橼酸根与血中钙离子形成难解离的络合物，钙离子是凝血过程中所需的物质之一，血液中钙离子减少，而使血液凝固受阻。 ;低渗的作用： 低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液，例如水、低渗的柠檬酸钠或