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人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测内 容HPV与宫颈癌宫颈癌检测方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用宫 颈 癌妇科第二大癌症每年约有20余万妇女死于宫颈癌新发病: 全球---50万/年 我国---13.2万/年宫 颈 癌姓名:哈拉尔德·楚尔·豪森国籍:德国民族:日耳曼课题:发现人乳头瘤病毒(HPV)引发宫颈癌成绩:获得2008年度诺贝尔生理学或医学奖Harald zur Hausen什么是HPV?Human Papilloma virus 人乳头瘤病毒双链DNA无包膜病毒广泛分布于高等脊椎动物 定向感染皮肤及粘膜的复层鳞状上皮HPV病毒电镜照片Circular逆转录区域包括控制病毒基因组复制的基因序列E6、E7为两种致癌蛋白编码,它们是高危型HPV导致细胞变性的主要原因E1、E2、E4和E5负责病毒复制L1、L2为两种病毒外壳蛋白编码在预防HPV的疫苗中使用了L1HPV的类型已经鉴定的乳头状瘤病毒有200多种与人有关的约125种30-40种感染生殖道低危型:HPV6、11、42、43、44等中间型:HPV31、33、35、39、51、52、58、59、68高危型:HPV16、18、45、56等临床最重要的型:6、11、16、18、31、33、35、38型8个亚型HPV感染HPV感染的途径和危险因素性行为混乱免疫抑制吸烟其他STD协同感染口服避孕药性传播直接皮肤接触母婴传播HPV感染率与发病率HPV感染与宫颈癌发病率变化图,Int J Cancer 1993,53:919HPV感染的不同阶段宫颈癌的癌前病变(CIN) CIN = Cervical Intraepithelial Neoplasia宫颈上皮内瘤样病变轻度(CINⅠ级):病变局限在上皮层的1/3内宫颈不典型增生中度(CINⅡ级):病变局限在上皮层的下2/3重度(CINⅢ级):病变几乎累及全部上皮层,仅 剩1-2 层表面的正常 鳞状上皮定义CIN宫颈上皮细胞部分或大部分被不同程度异型细胞所替代宫颈原位癌:宫颈上皮细胞发生癌变,但癌变未突破基底膜、间质无浸润。宫颈癌的癌前病变(CIN)专家共识宫颈癌的“元凶”就是高危型HPV感染高危型HPV感染是宫颈癌的必要条件没有HPV感染,就没有宫颈癌防治HPV感染,就是防治宫颈癌1995年,国际癌症研究协会认为高危固定价HPV的持续性感染是宫颈癌的主要病因宫颈癌感染HPV病毒? CIN?早期浸润癌5-15年唯一 知道病因的癌症唯一 可以通过早期干预阻断的癌症 内 容HPV与宫颈癌宫颈癌检测方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用宫颈癌检测方法学发展过程组织水平细胞水平分子水平宫颈癌筛查发展史HPV核酸检测灵敏度为98.6%特异度为99%新柏氏TCT灵敏度为80.8%特异度为 51-60%醋酸、碘液肉眼检测灵敏度为70.9%特异度为74.3%2000年1996年巴氏涂片灵敏度为50%以下特异度为?%1982年1941年组织学检测 肉眼观察 阴道镜观察 组织检查优点: 操作简单,价格低廉, 适宜作初步筛查; 缺点: 准确率低,人员素质 要求高,病人痛苦程度大。细胞学检测 传统巴氏涂片(CV) 液基薄层细胞学技术(TCT)自动细胞学检测系统(LCT)计算机辅助细胞检测系统(CCT)传统巴氏涂片液基细胞学细胞学检测的假阴性液基细胞学检测假阴性结果高达20%水平差的地方更高原因分析:1、视野局限 2、人为因素 1)取标本、片子制备 2)技术差异 3)耐心、责任心细胞学检测的假阳性1、 凹空细胞是HPV 感染的主要形 态学改变,但不是特异性改变2、 HPV正在清除阶段TCT检查HPV检测细胞学检测的性价比低TCT阴性 要求每年做同样的检查HPV阴性 可以把筛查时间延长到3-5年卫生部《宫颈癌筛查及早诊早治指南》核酸检测直接检查导致宫颈癌的元凶---HPV病毒灵敏度高,特异性好操作简便,可作为疗效评估 和监测指标宫颈癌筛查三方案基本方案:醋酸白实验一般方案:HPV核酸检测+传统巴氏涂片最佳方案:HPV核酸检测+液基细胞中国癌症研究协会推荐方法内 容HPV与宫颈癌宫颈癌检测方法比较HPV核酸检测方法学比较临床使用DNA分解45 minDNA-RNA杂交60 min抗体捕获60 min化学发光检测30 min计算机判读15 minHPV第一代核酸检测产品产品:HC2、港龙13型原理:杂交捕获技术特点:检测核酸、不分型、不能科学定量、检测时间长HPV核酸第二代检测产品产品:凯普21型、亚能23型、透景26型、达安19型、港龙29型原理:膜条杂交、液相杂交特点:可以分型,而且高低危都能做需要杂交、时间长。5-10个小时不等。开放式杂交、极易导致实验室生物污染。结果需肉眼判读,增加人为误差。不能定量
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