实验六 微生物的简单染色及革兰氏染色.pptxVIP

细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的 制片和简单染色 革兰氏染色法 细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的 制片和简单染色 一、实验目的 学习掌握微生物制片及简单染色的基本 技术 初步了解细菌、放线菌、酵母菌及 霉菌的形态特征和相互区别 巩固显微镜操作技术及无菌操作 技术二、基本原理 染色前必须固定细菌 其目的有二： 一是杀死细菌并使菌体粘附于玻片上 二是增加其对染料的亲和力 常用的有加热和化学固定两种方法 固定时尽量维持细胞原有的形 常用碱性染料进行简单染色，原因在于微生物细胞在碱性、中性及弱酸性溶液中常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，因此碱性染料的染色部分很容易与微生物细胞结合使其着色。常用作简单染色的染料有美蓝、结晶紫、碱性复红等。 当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带 正电荷增加，此时可用伊红、酸性复红或刚果红 等酸性染料染色三、实验器材与试剂 菌种：牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养的12-18小时枯草芽 胞杆菌和培养24h的金黄色葡萄球菌 溶液和试剂：草酸铵结晶紫染液、齐氏石炭酸复红染液、 吕氏碱性美蓝染液、革兰氏染色用碘液、 乳酸石炭酸棉蓝染液 仪器和其他用品：双层瓶、接种环、接种铲、接种针、 平皿、U型玻璃棒、解剖针、 解剖刀、 50%乙醇、20%甘油、高氏一号培养 基平板、马铃薯琼脂薄层平板等四、操作步骤安全警示1.加热固定时要使用载玻片夹