吸光光度分析剖析.pptxVIP

化工分析;显色反应及其应用; 8.1 物质对光的选择性吸收 ;8.1.1 光吸收的本质;8.1.2 光吸收曲线;8.1.2 光吸收曲线;8.1.3 光吸收定律;8.1.3 光吸收定律; 在分光光度法中还经常以透射比倒数的对数表示溶液对光的吸收程度，称为吸光度，用A表示。;光的吸收定律，称为朗伯-比尔定律; 8.2 显色反应及其应用 ;8.2.1 显色剂的选择; 显色剂可分为无机显色剂和有机显色剂两大类 无机显色剂 有机显色剂 利用两种试剂与待测物质形成三元配合物的显色反应(三元配合物是指由三个组分形成的配合物)，选择性与灵敏度都好。;8.2.2 显色反应条件;8.2.2 显色反应条件;8.2.2.2 溶液的酸度 显色反应的适宜酸度一般通过实验来确定，其方法是固定待测组分及显色剂浓度，改变溶液的pH，分别测定吸光度，作出吸光度与pH关系曲线。;8.2.2 显色反应条件;8.2.2.3 温度和显色时间 显色反应速率有快有慢。多数显色反应在室温下几分钟即可完成，颜色深度很快达到稳定状态。有些显色反应速率较慢，需经较长时间颜色才能稳定，这种情况下可适当加热。因此应根据显色反应时间和有色化合物的稳定时间，来确定吸光度的测量时间，过早或过晚都会产生测定误差。;8.2.2.4 溶剂 显色反应所用溶剂影响有色化合物的稳定性、溶解度和测定的灵敏度。多数显色反应可在水溶液中进行。但有些有色化合物在水中溶解度较小，离解度大；而在某种有机溶剂中溶解度大，离解度小，这样溶液中就会有更多的吸光分子，从而提高了测定的灵敏度。;8.2.2.5 干扰及消除 试液中除了待测组分外，往往含有其他共存离子。若其他离子本身有色或能与显色剂作用生成有色化合物，都将干扰测定。一般可采用下列方法消除其他共存离子的干扰。 控制酸度。 掩蔽。 改变干扰离子的价态。;8.2.3 应用实例;8.2.3.2 某些有机物的测定 在有机化工生产过程中，由于副反应、分离不完全等因素，产品中往往含有微量其他有机物。在不具备紫外分光光度计和气相色谱仪(见第九章)的情况下，可以利用显色反应测定一些有机物。 微量羰基化合物 微量挥发酚 ; 8.3 分光光度计及其操作 ;8.3.1 仪??的组成;8.3.2 721型分光光度计;8.3.2 721型分光光度计;8.3.2.1 主要调节器 波长调节器(λ)由波长选择旋钮和读数盘组成。 调0%T电位器(0) 调100%T电位器(100) 吸收池架拉杆暗箱内放吸收池架和吸收池 灵敏度选择钮;8.3.2.2 操作步骤 打开电源开关6，指示灯亮，开启吸收池暗箱盖7(光闸门自动关闭，预热20min。 调节波长选择旋钮1，选定所需单色光波长。 将空白溶液和被测溶液装入吸收池，依次放入吸收池架中，盖上吸收池暗箱盖(光闸门自动开启)，使光电管受光(此时空白溶液在光路中)，顺时针旋转调100%T旋钮，使电表指针指在100%T(A=0)位置。若指针达不到，可增大灵敏度档次。;按上述步骤反复调节0%T和100%T，直至稳定不变。 拉动吸收池架拉杆4，将待测溶液依次送入光路，由电表读出吸光度A或透射比T(％)值。 测定完毕，切断电源。取出吸收池，在暗箱中放入干燥剂袋，盖好暗箱盖。;8.3.3 722型分光光度计;8.3.3 722型分光光度计; 与721型相比，722型分光光度计的测量精度有所提高。这里仅介绍一下其功能和操作方面与721型不同之处。 读数精度的校准 透射比和吸光度的测量 浓度c的测量;8.3.4 754C型紫外-可见分光光度计;8.3.4 754C型紫外-可见分光光度计;8.3.4.2 操作步骤 开机 打开样品室盖 选择光源 选择波长 调节波长旋钮，选择需用的单色光波长 调零调百 测试 关机;8.3.5 光度测量条件的选择;8.3.5.2 空白溶液 空白溶液又叫参比溶液，用于调节吸光度零点(T＝100%)。;8.3.5.3 读数范围 由721型分光光度计显示电表的标尺可以看到，被测溶液吸光度值太小或太大都会影响测量的准确度。在标尺右端，吸光度太小，测量的相对误差必然很大；在标尺左端，吸光度刻度很密，难以读准。因此应创造条件使吸光度读数适中，最好控制吸光度读数范围为0-2～0-8。通过调整溶液的浓度或选择适当厚度的吸收池，可使吸光度读数落在适宜的范围内。; 8.4 定量分析方法 ;8.4.1 目视比色法;8.4.2 标准曲线法;8.4.2 标准曲线法;8.4.2 标准曲线法;8.4.2 标准曲线法;8.4.3 标准对照法;Thank you