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临床标本的细菌学鉴定1(综合性实验) ;教学目的和要求;本次实验内容;内容一:临床标本细菌学鉴定的方法及一般程序;细菌的鉴定依据;;内容二:临床标本细菌学检查;革兰染色:染色性及排列
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌普通平板生长现象普通平板(示教)
菌落黄色(有时黄色不典型)
菌落白色或柠檬色;表皮/腐生性葡萄球菌
无溶血环;鉴别葡萄球菌致病即金黄色葡萄球菌的重要指标
原理:凝固酶可催化:
血浆中的纤维蛋白原 → 纤维蛋白→血浆凝固
方法(见实验指导16页)
在抗凝血浆中加入菌液,
37℃ 3小时
结果:金黄色葡萄球菌(阳性)
表皮葡萄球菌(阴性);病原性球菌的生物学特性;?溶血
(窄、半透明、草绿色);肺炎球菌与甲型溶血性链球菌的区别试验(示教);病原性球菌的生物学特性;病原性球菌的生物学特性;分离培养;分离培养:;;内容二:粪便标本细菌学检查;大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌生物学特征比较;含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等; SS琼脂平板(下次实验课示教)
基础性成分:牛肉膏,蛋白胨,琼脂
抑制性成分:硫代硫酸钠,煌绿,胆盐等抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长
鉴别性成分:乳糖—分解产酸
指示性成分:中性红—酸碱指示剂—产酸变红;观察指标:葡萄糖、乳糖发酵、H2S、动力;;;金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌普通平板生长现象;
注意观察菌落特征
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、(甲、乙)型溶血性链球菌及肺炎球菌在血平板的生长现象;
注意观察菌落特征、溶血环
肺炎球菌、甲型溶血性链球菌胆汁溶菌试验
肺炎球菌、甲型溶血性链球菌菊糖发酵试验
脑膜炎双球菌在巧克力血平板的生长现象
注意观察菌落特征;实验材料:
每组一套标本,编号1号--8号
每人1个(注意勿污染,下个班还用)
每人1块平板(SS平板或血平板)
操作1:临床标本的分离培养(分区划线)
血液标本:接种血平板
粪便标本:接种SS平板
操作2:标本的革兰染色(初步诊断)
操作3:无菌分装培养基(下次实验用) ;观察临床标本的分离培养物
血平板:观察溶血现象,菌落颜色
SS平板:观察菌落颜色
鉴定:挑取可疑致病菌菌落进一步鉴定
挑取可疑致病菌涂布做革兰染色
明确诊断
示教:肠道杆菌生化试验
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