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- 2020-02-18 发布于上海
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实验三 培养基的制备及灭菌一 、实验目的1、了解培养基制备原理,学习并掌握培养基制备方法。2、掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的原理和方法。二、基本原理(一)培养基的制备原理培养基是微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。从营养角度分析: ?营养:碳源、氮源、生长因子、水分和无机盐等; ?适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力; ?一定的氧化还原电位; ?合适的渗透压。(二)灭菌原理1、干热灭菌原理 干热是指相对湿度在20%以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热,传热效果较慢。一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死,芽孢需160-170℃经2小时方可杀死。2、干热灭菌操作步骤(1)在移液管尾部塞上少许棉花,然后用报纸条 包好;用报纸条包好干燥的培养皿。(2)将待灭菌物品包扎好,均匀放入烘箱内,注 意不要摆的太挤,以免妨碍气流流通。(3)开启电源,设定温度为160℃ ~170℃ ,保持 此温度1~2小时。(4)切断电源,待温度降至70℃以下时,打开箱 门,取出灭菌物品。2、湿热灭菌原理-高压蒸汽灭菌 在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。高压蒸汽灭菌操作步骤(1)加水: 直接加水至锅内底部隔板以下1/3处。有加水口者由加水口加入至止水
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