动物垫料中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法-内蒙古.docVIP

ICS? FORMTEXT 07.100.99 FORMTEXT B 41 FORMTEXT ????? DB FORMTEXT 15 FORMTEXT 内蒙古自治区地方标准 DB FORMTEXT 15/ FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT ????? FORMTEXT 动物垫料中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法 FORMTEXT Method for detecting Listeria monocytogenes in animal padding FORMTEXT 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 FORMDROPDOWN FORMTEXT ????? FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 内蒙古自治区市场监督管理局???发布 DBXX/ XXXXX—XXXX PAGE 11 前??言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国呼和浩特海关提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国呼和浩特海关、内蒙古农业大学、鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心、内蒙古自治区农牧业科学院。 本标准主要起草人：赵治国、郭晓宇、张晓东、敖威华、王海艳、崔强、陈林军、延涵、李军燕、罗晓平。 动物垫料中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法 范围 本标准规定了动物垫料中单核细胞增生李斯特氏菌的分离鉴定定性检测法。 本标准适用于动物垫料中单核细胞增生李斯特氏菌定性检测。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 33682 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴别微生物方法通则 SN/T 1538.1 培养基制备指南 第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 SN/T 1538.2 培养基制备指南 第2部分：培养基性能测试实用指南 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 动物垫料 animal bedding 用于吸收动物排泄物，使动物保持舒适生活环境的铺垫物。也包括动物笼内非直接与动物机体接触的铺垫物。 设备和材料 4.1 冰箱：2 ℃～5 ℃。 4.2 恒温培养箱：30 ℃±1 ℃，36 ℃±1 ℃。 4.3 均质器。 4.4 振荡器。 4.5 电子天平：感量0.1 g，0.0001 g。 4.6 全自动微生物生化鉴定系统。 4.7 飞行时间质谱仪。 4.8 二级生物安全柜。 3.9 显微镜：10×～100×。 4.10 pH 计。 4.11 微量移液器。 4.12 无菌锥形瓶：500 mL，250 mL。 4.13 无菌吸管：1 mL(具0.01 mL刻度)、10 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。 4.14 无菌培养皿：15 mm×90 mm。 4.17 无菌试管：18 mm×180 mm。 4.18 无菌量筒：250 mL，1000 mL。 4.19 无菌棉签。 4.20 无菌镊子。 4.21 无菌剪刀。 4.22 无菌勺。 4.23 无菌玻片。 4.24 1μL无菌接种环。 5 培养基和试剂 5.1 实验用水：符合GB/T 6682的要求。 5.2 含0.6 %酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE):见 A.2。 5.3 Half Fraser肉汤和Fraser肉汤:见 A.3。 5.4 牛津琼脂: 见 A.4。 5.5 革兰氏染液:见 A.5。 5.6 SIM 动力培养基:见 A.6。 5.7 缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和 V-P试验用]:见 A.7。 5.8 5 %~8 %羊血琼脂:见 A.8。 5.9 糖发酵培养基（木糖和鼠李糖）：见 A.9。 5.10 过氧化氢试剂:见 A.10。 5.11 无菌生理盐水:见 A.11。 5.12 李斯特氏菌显色培养基。 5.13 生化鉴定试剂盒或革兰氏阳性菌生化鉴定卡。 6 检验程序 样品制备 样品制备 检样 检样25 g（mL）+ 225 mL Half Fraser肉汤，均质 30 ℃±1℃,24 h±2 h 0.1 mL培养物匀液 + 10 mL 0.1 mL培养物匀液 + 10 mL Fraser肉汤 30 ℃±1℃,24 h±2 h 牛津琼脂平板李斯特氏