针对srbsdv水稻病毒的elisa检测方法.pptxVIP

水稻病毒的主要检测方法：病株症状观察:但前期感染水稻无典型症状特征，且无法观察稻飞虱是否带病毒；电镜观察；RT-PCR和qRT-PCR方法；核酸检测方法：核算杂交和测序；高通量的血清方法：ELISA(dot-ELISA、ACP-ELISA、DAS-ELISA、TAS-ELISA)、免疫胶体金试纸条；血清学检测方法关键是获得高特异性、高灵敏度的病毒抗体ELISA基本原理：把具有免疫活性的免疫蛋白(抗原或抗体)结合到某种固相载体表面。使该免疫蛋白与某种特异性的酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体在检测中由于未经过其他任何处理,所以既有免疫活性,同时又保留其酶的活性。在试验时,把受检样品(待测的抗原或抗体)与酶标抗原或抗体按不同的步骤在固相载体表面起反应。然后用缓冲液洗漆,使固相载体上的抗原抗体复合物与其他物质分开。在一定范围内,结合在固相载体上的酶量与样品中受检物质的量成一定的比例关系。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,因为产物的量与样品中受检物质的量直接相关,故可根据反应物颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶是一种生物催化剂,催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的灵敏度。dot-ELISA实验方法：一、材料：具有典型矮缩症状和条纹叶枯症状的水稻植株采自田间水稻植株上的白背飞風材料，暂时浸泡在无水乙醇中备用。二、抗原：用感染RBSDV的玉米病叶