不可忽视的细节.pptxVIP

内容DNA提取的原则基因组提取方法样本保存和前处理基因组提取流程DNA保存及检测方法试剂选择原则 DNA Length没有严格要求: PCR Southern Blots RFLP严格要求片段长度: 构建文库 PFGE(脉冲场凝胶电泳)DNA提取原则1：DNA片段长度DNA提取原则2：DNA产物纯度没有严格要求 常规PCR严格要求产物纯度 存档、产物长期保存 Southern杂交 荧光定量PCR SNP Microarray CGH (比较基因组杂交) 内容DNA提取的原则基因组提取方法样本保存和前处理基因组提取流程DNA保存及检测方法试剂选择原则 基因组提取方法溶液盐析法：无需酚氯仿，样本量灵活可变，得率高硅胶膜吸附法：利用硅胶膜特异吸附核酸的原理来纯化核酸磁珠法：独特包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。传统酚氯仿法：传统方法，抽提时间长，成本低。但酚氯仿有毒，危害身体健康。内容DNA提取的原则基因组提取方法样本保存和前处理基因组提取流程DNA保存及检测方法试剂选择原则 样本保存和前处理－抗凝血液保存 柠檬酸、EDTA、肝素三种抗凝剂均可使用。但肝素对酶反应有可能起阻害作用,采血时如没有特殊要求,请使用柠檬酸或EDTA处理血样。加入抗凝剂混匀后2-8℃保存一周；－20℃保存一个月；－70℃长期保存