2020年全国通用高考生物二轮复习：专题练习基因工程与细胞工程.pdf

非选择题（每小题15分，共120分） 1. 根据基因工程的有关知识，回答下列问题： （1） 限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有黏性末端和平末端。 （2） 质粒运载体用EcoR I切割后产生的片段如下： AATTC……G G……CTTAA 为使运载体与 目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性内切 酶切割， 酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoR_ I切割产生的相同（其他合理答案也可）。 （3） 按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即大肠杆菌DNA连接酶和乌DNA连接 酶。 （4） 反转录作用的模板是mRNA（或RNA）,产物是cDNA（或DNA）。若要在体外获得大量反转录产物， 常采用PCR技术。 （5） 基因工程中除质粒外，噬菌体和动植物病毒（其他合理答案也可）也可作为运载体。 （6） 若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是差 处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱（其他合理答案也可）。 解析：此题考查基因工程应用的相关知识。⑴DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏 性末端和平末端两种类型。⑵为使运载体与 目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一 种限制酶切割产生的末端必须与EcoRI切割产生的末端相同。（3）根据酶的来源不同，DNA连接酶分为大 肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶。（4）以RNA为模板，合成DNA的过程称为逆转录，若要在体外获 得大量DNA分子，可以使用PCR技术。（5）在基因工程中，通常利用质粒作为运载体，另外噬菌体和动植 物病毒也可作为运载体。（6）大肠杆菌作为受体细胞时，常用Ca2+处理，使之成为能吸收周围环境中DNA 分子的感受态细胞。 2. 肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技 术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。 基因工程技术基本流程如图1。 请回答： US3传代培养 肺癌细胞 图1 ⑴进行过程①时，需用限制性核酸内切 （或限制）酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶 识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录， 部位称为启动子。 ⑵进行过程②时，需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。 （3）研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取 RNA进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RAS 蛋白（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。 如-7基因 RAS基因 图2 解析：此题考查基因工程应用的相关知识。⑴构建基因表达载体时，需要用同种限制酶切割 目的基因 和载体，使之产生相同的黏性末端。载体应有启动子、终止子和标记基因，其中启动子是RNA聚合酶识 别和结合部位，驱动基因转录。（2）动物细胞培养时，常用胰蛋白酶处理贴壁的细胞，使之相互分离，以利 于传代培养。（3）检验目的基因是否表达，常用分子杂交法。从被导入 目的基因的细胞内提取RNA,与目的 基因单链杂交，如果出现杂交带，说明目的基因已转录。由图2知，当let-7基因转录出来的miRNA与 癌基因RAS转录出的mRNA杂交时，就会抑制RAS蛋白的产生，故肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于 细胞中RAS蛋白含量减少引起的。 . （2018 •宁夏银川一中第二次月考）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发 利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。