节噬菌体抗体工程.pptVIP

第四节 噬菌体抗体工程 20世纪80年代中期以来抗体工程技术得到突破性进展，目前抗体库筛选技术包括噬菌体抗体库 合成抗体库 和核糖体展示技术。特别是噬菌体随机表面文库技术的建立和发展促使了噬菌体抗体库技术的生产.1991年等报道了噬菌体抗体库技术,这一技术使抗体表达,扩增和筛选更为有效. 噬菌体抗体库是 丝状噬菌体展示技术和 抗体组合文库技术 的结合,为人源抗体的制备提供了新途径,可视为抗体工程史的里程碑. 利用靶分子，采用适当的淘洗方法（亲和→洗脱→扩增→亲和的循环步骤），洗去非特异结合的噬菌体，最终从噬菌体文库中筛选出能结合靶分子的目的噬菌体；外源多肽或蛋白质表达在噬菌体的表面，而其编码基因作为病毒基因组中的一部分可通过噬菌体 序列测序出来，使得表达蛋白（表现型）和编码基因（基因型）之间完美地结合起来，为生物科学提供高效而实用的研究手段。 一 噬菌体展示的基本原理 . : . ,1985 ,228 :1315 - 1317. 1985年首次通过基因工程的手段,将外源基因插入丝状噬菌体基因组中,从而使表达的外源肽或蛋白与噬菌体外壳蛋白一起展示在噬菌体表面,由此建立了噬菌体展示技术。 1990年等首次将随机序列肽与丝状噬菌体表面蛋白g 融合展示在噬菌体表面,建立了噬菌体展示随机