CMA芯片技术应用于辅助生殖植入前产前产后先天性疾病诊断的初步应用PPT课件.ppt

.卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. .卫生. .管理. CMA芯片技术应用于辅助生殖植入前/产前/产后先天性疾病诊断的初步应用 浙江大学医学院附属妇产科医院 * 出生缺陷 出生时就有外表的、内部的结构异常或功能异常 我国出生缺陷率达5.6% 每年新增出生缺陷约90万例 日益成为突出的公共卫生问题和社会问题 * 出生缺陷 出生缺陷 遗传因素 环境因素（理、化、生物因素、生活方式） 遗传+环境因素 染色体异常（所有新生儿中，染色体异常占0.92%，多为新发而非遗传） 单基因突变（多为孟德尔遗传，少数为新发） * 出生缺陷干预----关注生殖全程 高危人群 目标人群 产前诊断 孕前诊断 不孕人群 精子 产后先天性疾病诊断 卵子 + 胚胎 胎儿 新生儿、儿童 * 对胚胎或卵子行卵裂球或极体活检，作染色体和/或基因学检测，将无疾病胚胎植入子宫妊娠，并出生正常子代的技术 辅助生殖与遗传学技术相结合的一种产前诊断方法 关键点是建立单细胞遗传诊断技术 孕前诊断-----植入前遗传学诊断技术(preimplantation Genetic Diagnosis, PGD) * 染色体疾病的诊断 在人类染色体研究历史上,研究者一直致力于利用可视化的显微镜分析染色体的完整性 除了非整倍体，染色体微缺失、重复、扩增和等基因组DNA失衡是导致胎儿发育迟缓、畸形、死胎、流产和其他先天性疾病的内在原因 * 是目前较为成熟的遗传性疾病诊断技术 传统核型分析技术 绒毛活检取材 孕中期羊膜腔穿刺羊水 细胞培养 染色体核型分析 对非整倍体和重大染色体结构异常诊断的准确率达到99% * 局限性 材料受限，需要新鲜的组织、血样进行活细胞培养 不能分辨长度在10Mb以下染色体片断的缺失、增加或易位 染色体亚端粒区域异常诊断率较低 单细胞分析 高分辨率分析 * 荧光原位杂交技术（fluorescent in-situ hybridization，FISH) 可对相应位点的缺失、重复、易位及多倍体等染色体异常作出诊断 提高了染色体异常的诊断精度 FISH探针能同时与分裂期染色体或间期核染色丝特异杂交----无需细胞培养，可用于单细胞分析 Chromosome 13q13-14 Chromosome 21q21 荧光标记的DNA探针 中期分裂相 间期细胞核 * FISH局限性 只能对有限的位点进行检测 FISH依赖于探针的设计，检测不明原因的病例难度较大 对植入前胚胎的检测，缺乏覆盖全基因组检测的能力 * Metaphase chromosomes blastomere normal 11 normal 22 der 11 der 22 Reciprocal translocation t(11;22)(q25;q12) Metaphase chromosomes blastomere normal 13 normal 14 der 13-14 Robertsonian translocation der(13;14)(q10;q10) FISH for structural aberrations 2-colour FISH 3-colour FISH * 比较基因组杂交（ comparative genomic hybridization, CGH ) 1：1混合杂交于同个正常男性中期分裂相 Cot-1 DNA 双色荧光强度比分析 正常 DNA 病人 DNA Gain Loss LOSS Gain * 1：1混合杂交于芯片（BAC.Oligoarray，SNP) Cot-1 DNA 计算机扫描，数据分析 病人 DNA 正常DNA Gain Loss 微阵列比较基因组杂交技术（ Array Comparative genomic hybridization，aCGH) * * aCGH优势 结合了基因芯片和传统CGH的优点 更高的分辨率： G-显带的分辨率：10Mb 传统CGH:5-10Mb Array CGH:100kb 检测基因组的拷贝数变化，可对染色体非整倍体、微缺失或微重复或其他不平衡的染色体异常检测 能够对染色体异常进行精确定位 结合全基因扩增技术，可以进行胚胎全染色体组的检测------PGS/PGD * * 用于检测CNV的染色体芯片（CMA)在下列情况应作为一线检测手段 非已知综合症的多发畸形 非综合症型的发育迟缓/智力低下 孤独症谱系疾病 进一步明确发育迟缓、语言发育落后和其他尚不明确遗传学病