绿色荧光蛋白gfp标记方法.pptVIP

纤维素降解菌X-3的GFP标记 gfp质粒的提取 试验路线 gfp质粒+X-3感受态细胞 X-3感受态细胞的制备 电击转化 X-3-gfp标记菌 经过传代培养验证其稳定性，同时检测其相关理化特性（ph，温度，含氧量，转速等）是否受到影响，确定gfp标记的细菌可以用于进一步研究 GFP标记 菌落观察 油镜观察 本实验所需的的材料 1.LB培养基：蛋白胨 10g，NaCl 10 g，酵母浸膏5 g，蒸馏水 1000ml，pH 7.0 2.抗生素壮观霉素（Spectinomycine Spe）购自Sigma公司 3.PEB洗涤液：蔗糖93.1g， MgCl2 0.2g，KH2PO4 0.953g,H2O 1000ml, pH 7.4 3.电转仪：伯乐MicroPulser电穿孔仪 4.立体荧光显微镜：（Leica MZ12）为瑞士莱卡仪器公司产品 5.荧光显微镜：ECLIPSE 80i高级研究型显微镜 6.离心机：EPPENDORF 7.凝胶成像仪：BIO-RAD Universal Hood Gel-Doc UV Imaging System 8.质粒DNA：购自AxyGEN生产的AxyPrep质粒DNA 一.gfp质粒的提取 1.先在卡那培养基上过夜培养菌液，然后提取该菌液进行实验 2.按照AxyGEN生产的AxyPrep质粒DNA说明书上