考点2 动物细胞培养与体细胞克隆 1.动物细胞工程的技术手段:动物细胞培养、体细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体的制备等。 动物细胞培养 是动物细胞工程的基础。 ? 2.动物细胞培养 (1)过程 (2)培养条件 ②营养:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入 血清、血浆 等一些天然成分。 ? ③适宜的温度:36.5±0.5 ℃;适宜的pH: 7.2~7.4 。? ④气体环境:95%空气加5%CO2的混合气体。 3.动物体细胞克隆技术(核移植技术) (1)原理: 动物细胞核具有全能性 。 ? (2)哺乳动物核移植分类: 胚胎细胞 核移植和体细胞核移植。 (3)体细胞核移植过程(以高产奶牛克隆为例) (4)选用去核卵母细胞的原因:卵母细胞比较大,易操作;卵母细胞细胞质多, 营养丰富 ,含有 促进核全能性表达 的物质。 ? (5)体细胞核移植技术存在的问题: 克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等 。 ? 考点3 细胞融合与单克隆抗体 1.动物细胞融合 (1)动物细胞融合原理: 细胞膜具有一定的流动性 。 ? (2)动物细胞融合方法:物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙二醇)和 生物法(灭活的病毒) 。 ? (3)结果:形成 杂交细胞 。? (4)意义:突破了远缘杂交不亲和的障碍。 (5)应用:制备单克隆抗体。 2.单克隆抗体的
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