实验细菌转化.pptxVIP

;一、实验目的;二、实验原理;三、实验菌株;四、实验用具和药品;LB培养基配方：;实验药品;五、实验步骤;（二）菌体收集 实验当天 ： 将过夜培养的菌体转入1.5mL离心管，5000r/min离心2min； 弃上清;（三）碱裂解法提取质粒DNA 全套操作约需1小时，详细说明如下。 3. 加入250 μl的Solution Ⅰ（含RNase A1）充分悬浮细菌沉淀。 注）注意不要残留细小菌块，可以使用振荡器（Vortex）等剧烈振荡使菌体充分悬浮。 4. 加入250 μl的Solution Ⅱ轻轻地上下翻转混合5～6次，使菌体充分裂解，形成透明溶液。 注）此步骤不宜超过5分钟。 5. 加入400 μl的4℃预冷的Solution Ⅲ，轻轻上下翻转混合5～6次，直至形成紧实凝集块，然后室温静置2分钟。 6. 室温12,000 rpm离心10分钟，取上清。 注）此时4℃离心不利于沉淀沉降。 7. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube 上。 8. 将上述操作6的上清液转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。;;六、实验作业;实验二 大肠杆菌的遗传转化;一、实验目的;二、实验原理;三、实验材料;四、实验用品; 0.1M CaCl2溶液配制： 称量1.11g无水CaCl2固体，溶于1