实验三酶学实验.pptxVIP

第1页/共22页实验内容实验十四 pH值对酶促反应速度的影响 实验十五 温度对酶促反应速度的影响实验十六 底物浓度对酶促反应速度的影响实验十七 抑制剂对酶促反应速度的影响第2页/共22页实验十四 pH值对酶促反应速度的影响【实验目的】1．掌握pH对酶促反应速度的影响。2．了解测定酶活性的原理、学会操作。第3页/共22页【实验原理】酶的本质是蛋白质，构象及电荷状态影响酶与底物的结合催化，因此酶活性会受溶液pH的影响。底物或辅基的解离程度受溶液pH的影响。酶的最适pH值 ：一定的pH范围内，酶才表现其催化活性，而且在某一pH值时，酶的催化活性达最大值。 AKP（碱性磷酸酶）活性测定：磷酸苯二钠法 第4页/共22页铁氰化钾第5页/共22页【实验试剂】（1）甘氨酸缓冲液：多种pH值 （2）酶液 （3）0.04mol/L基质液 （4） 0.3% 4-氨基安替比林 （5） 0.5%铁氰化钾溶液 第6页/共22页【实验方法】1.取小试管6支，编号，按下表操作：管 号 1 2 3 4 5 6甘氨酸缓冲液pH 8.0 pH 9.0 pH 10.0 pH 11.0 pH 12.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 蒸馏水1.00.