临床生化检验—干扰实验2015检本.ppt

方法学评价实验安排 序号 综合实验内容 结果汇报及解释 方法学评价实验 室内质量控制实验 室间质量评价实验 准备 试剂、样本准备 质控物分装、冷藏 学生编号保存 质控物收集 实验前发放 1 重复性实验 2 回收试验 制作L-J质控图表 2个浓度质控物*2 讨论组（1/7） 3 干扰试验 2个浓度质控物*2 5个浓度质控物*1 讨论组（2/8） 4 线性试验 2个浓度质控物*2 讨论组（3/9） 5 检测能力试验 2个浓度质控物*2 5个浓度质控物*1 讨论组（4/10） 汇总 讨论 方法学评价论文 室内质控分析报告 室间质评分析报告 讨论组（5/11） 室间质评 主讲：余琳 干扰试验 学习目的 掌握：方法学干扰试验的设计原理及意义。 熟悉：干扰试验的操作过程。 了解：干扰试验在临床中的应用价值。 干扰试验的原理 1.本实验选用VitC做GOD-POD法测血糖的干扰试验。 维生素C具有还原性，可与GOD反应生成的H2O2发生反应，干扰H2O2参加第二步POD的偶联反应，从而降低显色强度，使检测结果偏低。 因此， VitC对该反应有干扰，但不是VitC被测定。 VitC 干扰试验的原理 2.干扰试验可反映分析物以外其他物质对分析方法对分析物测定准确度的影响。以评价分析方法的准确性。干扰物浓度一定时，产生的误差是恒定系统误差。 实验用试剂 1.干扰实验：血清标本、VitC（15mmol/L）、生理盐水。 配制4个样品：基础样品和干扰样品I、II、III 2.室内质控：测定1号和2号2个质控品，每个质控品在实验前测 定一次 3.室间质评：测定5个具有靶值的血清样品（测定一次，上报结果） 4.GOD-POD法测血糖（葡萄糖标准液5.55mmol/L) S：R＝1：150 37。C 10min 波长＝505nm 干扰试验操作步骤1．样品制备 样品制备 基础样品 干扰样品 I 干扰样品 II 干扰样品III 血清 0.9ml 0.9ml 0.9ml 0.9ml VitC 15mmol/L — 0.01ml 0.05ml 0.07ml 蒸馏水 0.1ml 0.09ml 0.05ml 0.03ml 总体积 1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml 样品 干扰I 干扰II 干扰III 基础 ？VitC ？VitC ？VitC 蒸馏水 2．血糖浓度测定 按GOD-POD法分别测定4个制备样品的血糖浓度。 S：R＝1：150 37。C 10min 波长＝505nm 计算 1．干扰物加入值计算（终浓度） 干扰物加入浓度(mg/L)=干扰物浓度× 2．干扰值计算（偏差） 干扰值（mmol/L）＝干扰样品测得值－基础样品测得值 3．干扰率计算 干扰率(%)=干扰值/基础值 ×100 请将各计算结果填入表1内 结果判断 Bias即偏差。所有测定值系统性的偏离真值，表示系统误差的大小。在干扰试验中，偏差＝干扰样品测定值-基础样品测定值。 EA指允许分析误差，它被规定为95％样品的允许误差限度。 Bias＜允许误差，表明由干扰物引起的偏差对临床诊断和治疗不产生不良影响，可被接受。当干扰物引起的偏差小于1/2TEa（血糖TEa10%） 注意事项 吸量准确; 可疑干扰物; 干扰物浓度 ; 加入体积。 【思考题】 VitC对我们的实验造成什么影响？干扰试验反映的是实验方法的哪种误差？ 如何做室间质评？有何作用？