U3000高效液相色谱仪操作规程及封面.docxVIP

安徽省产品质量监督检验检验研究院仪器设备 操  作  规  程 （cg— — —2016） 设备编号（ ） 仪器名称 U3000 液相色谱仪操作规程 编 审 批  制 核 准 2016 年  月  日 U3000 高效液相色谱仪操作规程 一 基本原理 U3000 高效液相色谱系统由：①输液泵②自动 进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系 统组成。 使用高效液相色谱时，液体待检测物由流动相 带入色谱柱，通过压力在色谱柱中移动，由于试样 中各组分在色谱柱内固定相与流动相间分配或吸附 特性的差异，不同的物质组分顺序离开色谱柱，经 检测器检测得到不同的色谱峰信号，依据组分的保 留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量 分析。 二 操作前准备 1.1 流动相的配制： 1.1.1 根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经 验等按比例配制流动相。 1.1.2 根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还 2 是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。 1.1.3 将过滤后的流动相进行超声脱气 10~15 分钟。 1.2 对照品供试品处理： 1.2.1 称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶 剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解 （也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为 0.1~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。 1.2.2 根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤 膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。 1.3 色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。 三 操作顺序 开机 1 打开 UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电 源开关； 2.2 打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER）， 启动电脑； 2.3 依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源； 3 2.4 双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对 话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地 仪器控制器 运行空闲”,可以关闭界面。 2.5 双击在桌面上的 Chromeleon 7 图标（工作站主程 序）。 2.6 在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控 制面板。 2.7 旋开泵上的排液阀(两圈以上)；设置 A 通道为 100%，点击“冲洗”，然后再出现的对话框中点击“忽 略并执行”；（默认冲洗 5 分钟）；然后分别“冲洗”流 路中其他通道气泡；排完气泡后关闭排液阀； 2.8 设置流动相的比例及流速后，点击“马达”。此时 泵自动会以设置的流速进行运行。 9 在控制面板“柱温箱”控制框中，设置准备分析样 品所使用的柱温箱温度。 0 清洗进样口； 2.样品分析 4 3.1 建立仪器方法： 3.2 建立处理方法及报告模板（此步骤可以省略，直接 调用以前的）： 3.3 建立序列： 3.4 打开氘灯（待系统压力稳定后约 15min 后再开灯）： 在控制面板“Detector”控制框中，选中“紫外灯”选 框，及“可见灯”选框（如果波长在可见范围）。 3.5 在控制面板“UV”控制框中，设置波长，采集频率 （20HZ）；点击“监视基线”，选中通道 1 并确定。 3.6 待基线稳定后，点击“监视基线”，点击确定，关 闭查看基线。 3.7 点击左下方“数据”，并选中要分析的序列，然后 点击“开始”启动样品表进行分析（如果序列里有完成 的样品，则会变成继续，点继续；如果该序列还在队列 中则会显示删除，点击删除后在点击继续）； 3.8 在审计跟踪里出现“等待 pump-input1 上的进样响 应”，此时迅速将手动进样器扳到 load 位置，缓慢注入 样品适量（注意不能有气泡），然后迅速将手动进样器 5 扳到 inject 位置； 3.9 样品全部检测结束后，如果不再分析样品应立即关 掉氘灯，延长氘灯使用的寿命. 5、关机： 5.1 冲洗色谱柱（如果使用了缓冲盐，首先使用 10%甲 醇水溶液冲洗色谱柱 30 分钟，然后使用纯甲醇冲洗色 谱柱 30 分钟）。 5.2 关闭泵马达，断开连接，关闭工作站。 5.4 关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。 5.5 关闭计算机。关闭 UPS 电源或稳压电源。 四  注意事项 6.1 溶剂泵的使用注意事项： 使用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵 运转会磨损柱塞、缸体和密封环，最终产生漏夜。 防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质 微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预 先除去流动相中的任何固体颗粒。流动相过滤，可采用 滤膜（0.2um 或 0.45um）等滤过。 6 输液泵的工作压力不能超过规定的最高压力，否则会使 高压密封环变形，产生漏夜。 流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的 稳定性，如果有大量的气