植物组织培养第十二章2几种花卉组织培养.pptVIP

植物组织培养第十二章2几种花卉组织培养.ppt

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第十二章 (2) 几种花卉的组织培养;本章内容与目的要求: 掌握百合生物学特性和快速繁殖方法 掌握兰科植物组培的大致过程 掌握胡蝶兰花梗组培的方法;第一节 百合的组织培养;亚洲百合;麝香百合;一、形态特性和生物学习性;二、传统的繁殖方法;三、百合的组织培养;1、花器的组织培养;(2)培养基 花柱(花梗、茎段等):MS + IAA l.0 + BA 0.2 ; 叶片用:MS+NAA 1.0+BA 0.1 ; 植株分化:MS + NAA 2.0 + IBA 0.4 + Kt0.05; 以上均附加:蔗糖3%和琼脂0.7%,pH5.8~6.2。 (3)培养条件 光???度2000Lx,每天照用15h,保温 20℃。;★ 花器部位:以花丝的部位为好,成活率很高,发芽较多;其次为子房和花柱部分。 ★ 子球形成途径:一是从切中处形成愈伤组织,以后再发芽;或是从切口直接产生芽。 ★ 麝香百合花器培养得到的植株,生长约6个月即可开花,未发现不正常现象,只是母株的花较大,且全株无病毒症状。;2、鳞片组织培养 对于扩大培养材料来源,加快繁殖速度和培养得到无病毒苗等皆有重要意义。;(4)生长情况 ★ 接种2周后,即有98%左右的鳞片切块在近轴面或边缘上有淡黄色的不定芽原基呈环状突起(2~4个/块),4周后,可形成中间抽出绿色的白色小鳞茎,其基部发生一些粗壮的根。 ★ 将幼苗切成1.5~2cm长的片断,接种到诱导愈伤组织的培养基上,3周后叶子的基部、叶脉、叶缘上均可诱导出一团团淡黄色的愈伤组织。 ★愈伤组织转移到分化培养基10周后,逐渐膨大,分化出许多大小不等的鳞茎,并在基部长出许多粗壮的根。;(5)试管苗移栽 ★ 首先应把根部的培养基清洗干净。 ★ 移栽前,放在4~10℃低温条件下锻炼2~3周,这样移栽后的幼苗生长更加健壮。 ★ 移栽幼苗最好用消毒的腐殖土或泥炭土加蛭石的混合基质,育苗盘必须清洗消毒。 ★ 移栽后注意湿度管理,相对湿度控制在80~90%,防止烈日曝晒,后期幼苗不宜浇水过多,并及时喷洒药剂预防病虫危害。;四、鳞茎打破休眠的方法 百合栽培中首先避免因球根的休眠而导致发芽率不高及盲花。仅靠贮藏无法打破休眠,需要人工打破休眠,方法有: ;第二节 兰花的组织培养技术;★兰花系兰科植物,在自然条件下主要靠分株繁殖,繁殖率一年只有几倍,所以无法大量繁殖生产,而且由于长期进行无性繁殖,带病毒株增多,逐渐使种性降低,影响生长。 ;国兰原球茎的增殖;国兰幼苗的形成;主要部位是:顶芽侧芽和花梗等 1.新芽的茎尖 茎尖是细胞分裂最旺盛的部分,也是培养成功率最高的部位。 2.花梗 当兰花开花约一个月后,剪取其花梗顶端及若干个花梗腋芽。;三、茎尖的选取、灭菌和接种;2、培养基 ★ 大多兰花以MS培养基最好,另外KC培养基也不错。 ★ 大多品种兰的茎尖接种以固体培养基为好; ★ 蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则用固体培养基进行继代培养; ★ 卡德兰属和石斛属这一类易变褐枯死,以在液体培养基为好。;3.继代培养 ★ 接种后1~2个月培养的茎尖即可形成原球茎球状体,以后即发芽生根长叶。 ★ 发芽前把它切成小块进行转移,让它继续不断地形成原球茎球状体。 ★ 这样连续的进行继代培养,短时间可以得到大量的原球茎球状体。; ★ 苗有3~4叶大小,根2~3条时可移植。 (1)从试管内取的苗用水将琼脂冲洗掉,冲洗不彻 底会发生霉菌腐烂。 (2)经水冲洗的苗吸干水分阴晾1h再定植。 (3)移栽后保证,50%的弱光,温度20~25℃,保持一定的湿度,不能完全密闭,也要注意通风。根在开始生长后可1周浇一次1000倍的复合肥料。;第三节 蝴蝶兰的培养;1.茎尖培养 (1) 将芽外植体消毒:除去叶后,用水冲洗,10%的漂白粉灭菌15min。除去叶原基后,用5%的漂白粉灭菌l0min,以后用无菌水冲洗3~5次。 (2) 接种:切取茎尖和各叶基部的腋芽,约2~3mm大小,接种到培养基中。 (3) 培养基:采用VW培养基,添加15%CM进行液体培养,或进行固体培养。;茎尖;(4) 培养条件 ★ 温度25℃,光照强度2000Lx,照明16~24h。 ★ 液体培养基用60r/min的速度进行振荡培养,培养7~10d再转移到新的培养基,培养1个月后转移到固体培养基。 ★ 培养1个月即可形成原球茎球状体,以后再进行继代培养,不断繁殖原球茎球状体。;2、花梗腋芽的培养;茎尖;(3)培养条件: 光照强度2000Lx,光照时间13h/d,保持恒温25℃。;复习思考题 (1)百合的生物学特性怎样?怎样用鳞茎进行组织培养? (2)兰科植物培养过程包括哪几个环节? (3)蝶兰

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