第十二章 翻译.pptVIP

* * * * * fMet-tRNAfMet的生成是一碳化合物转移和利用的过程之一，反应由转甲酰基酶催化，甲酰基从N10-甲酰四氢叶酸转移到甲硫氨酸的α-氨基上。 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 第 二 节 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) 整个翻译过程可分为 ： 翻译过程从阅读框架的5′-AUG开始，按照mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链，直至终止密码出现。 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 原核、真核生物各种起始因子的生物功能 e （一）原核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离；（IF-1,IF-3结合） mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核蛋白体大亚基结合。（IF-1, IF-2，IF-3分离） IF-3 IF-1 1. 核蛋白体大小亚基分离 A U G 5 3 IF-3 IF-1 2. mRNA在小亚基定位结合 S-D序列: 位于原核mRNA起始密码子AUG上游约8-13个核苷酸位置的富含嘌呤碱基的一段保守序列，通常为AGGAGG, 因其可以与原核生物核糖体小亚基中16S RNA通过碱基配对而结合，又称核蛋白体结合位点 IF-3 IF-1 IF-2 -GTP 3. 起始氨基酰tRNA( fMet-tRNAimet )结合到小亚基 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 -GTP GDP Pi 4. 核蛋白体大亚基结合，起始复合物形成 A U G 5 3 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP GDP Pi 二、肽链合成延长 根据mRNA上密码子的排列顺序，依次添加氨基酸，从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EF-G 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位，促进卸载了氨基酸的tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 又称注册(registration) （一）进位 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。 延长因子EF-T催化进位（原核生物） Tu Tu Ts GTP A U G 5 3 Ts GTP Tu GDP （二）成肽 是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。 fMet A U G 5 3 fMet （三）转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 进位 转位 成肽 ribosomal cycle 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 一是识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 二是诱导转肽酶改变为酯酶活性，相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能 原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物释放因子：eRF 原核肽链合成终止过程 U A G 5 3 RF 多聚核蛋白体(polysome) ——使蛋白质合成高速、高效进行。 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 电镜下的多聚核蛋白体现象 遗传密码的四个特点；重点简并性、摆动性 起始密码、终止密码、S-D序列、阅读框架 以原核生物为例，说明蛋白质生物合成的过程（包括各种酶及蛋白质因子） 翻译后的加工 * * 蛋白质的生物合成（翻译）Protein Biosynthesis，Translation 第 十 二 章 蛋白质的生物合成，