植物细胞工程的基本技术的经典.ppt

应该掌握的几个概念： （1）愈伤组织： 离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过脱分化和细胞分裂，形成一种由高度液泡化的薄壁细胞组成的组织。薄壁细胞无定形状态、排列疏松无规则，无叶绿体,不进行光合作用 （2）植物细胞的脱分化： （3）植物细胞的再分化： 就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，又称去分化。 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 （4）脱分化的实质和结果是什么 ？ 提高我的能力 脱分化的实质是提高细胞的全能性过程，结果是形成愈伤组织。 (三）实验：胡萝卜的组织培养 获取 外植体 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 扩大培养 移栽 脱分化 再分化 (1)在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？ 防止杂菌污染，因为杂菌生长快，会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质，导致培养物迅速死亡。 合作学习 (2)在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下，胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花），是否也能培养成小植株，你能用实验的方法进行验证吗？ 胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 (3)请根据上面的实验过程，概括出植物组织培养技术的流程简图。 植物材料 （消毒） 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田 培养成正常植株 依据学过的知识和实验过程思考回答： (5)、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例 (4)、离体的器官、组织或细胞，如果不进行脱分化处理能否培养成完整的植物体？ 不能，因为细胞已经分化，失去了分裂能力。不进行脱分化处理就不能形成愈伤组织 生长素：细胞分裂素的比例 大于1----促进根形成 小于1-----促进芽的形成 等于1-----愈伤组织不分化 (6)、诱导愈伤组织的过程中对光有什么要求？为什么？ 一般避光培养； 在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。（但再分化时需要光，光能使细胞内形成叶绿体、叶绿素，进行光合作用） 提高我的能力 (7)、植物组织培养不同阶段分别是什么代谢类型？ 愈伤组织之前是异养需氧型（蔗糖供能），愈伤组织之后是自养需氧型。 小结： 植物组织培养的过程 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 （离体的,已分化组织或细胞） （未分化） （分化） 条件？ 优点？ 特点？ 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 幼苗无毒 保持优良性状 ①适宜温度、光照、 pH和无菌环境。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等） 无定形状态 薄壁细胞 高度液泡化 排列疏松、无规则 无叶绿体,不进行光合作用 植物组织培养的概念： 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 二、植物体细胞杂交技术： 因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？ “Potamato” 1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交。 2．有没有一种温和的去壁方法呢？ 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁（酶解法） 3、植物细胞去掉细胞壁后叫什么？ 原生质体 4．为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？(细胞融合的基础) 请思考： 细胞膜具有一定的流动性 7．如何将杂种细胞培育成杂种植株？ 5、人工诱导原生质体融合的方法有哪些？ 物理法 化学法 离心、振动、电激等 聚已二醇（PEG）作为诱导剂来诱导细胞融合 植物组织培育技术 6．原生质体融合的标志是什么？ 产生新的细胞壁 8．植物体细胞杂交技术完成的标志是什么？ 获得杂种植株 9、植物体细胞杂交的原理是什么？ 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 1、过程： 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交过程示意图 去壁 筛选 利用电激发将野生马铃薯与栽培马铃薯进行细胞融合 2、概念： 将不同种的植