高考生物真题分类汇编——专题现代生物科技.pdfVIP

1. （2016 江苏卷 .33） （9 分）下表是几种限制酶识别序列及其切割位 点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶 不重复标注。请回答下列问题： （1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒， 应选用 ______两种限制酶 切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过 __________酶作用后获得重组 质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于 ________态的大肠杆菌。 （2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌， 应在筛选平板培养基中 添加 __________，平板上长出的菌落，常用 PCR鉴定，所用的引物组成为 图 2 中_____________ 。 （3）若 H I 酶切的 DNA 末端与 I 酶切的 DNA 末端连接， Bam Bcl 连接部位的 6 个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶（填“都能” 、“都 不能”或“只有一种能” ）切开。 （4）若用 3A I 切图 1 质粒最多可能获得种大小不同的 DNA 片段。 Sau - 1 - / 7 2. （2016 课标 1 卷 .40）某一质粒载体如图所示， 外源 DNA 插入到 Amp r r r r 或 Tet 中会导致相应的基因失活（ Amp 表示氨苄青霉素抗性基因， Tet 表 示四环素抗性基因） 。有人将此质粒载体用 BamHI 酶切后，与用 BamHI 酶 切获得的目的基因混合，加入 DNA 连接酶进行连接反应，用得到的混合 物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化 的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入 了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题： （1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有 ______________ （答出两点即可）。而作为基因表达载体， 除满足上述基本 条件外，还需具有启动子和终止子。 （2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选， 在上述四种大肠杆菌 细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因 是______________；并且 ______________和______________的细胞也是不 能区分的， 其原因是 _____________ 。在上述筛选的基础上， 若要筛选含有 插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有是 _____________的固体培养基。 （3）基因工程中， 某些噬菌体经改造后可 以作为载体，其 DNA 复制所需的原料来自于 _____________ 3. （2016 新课标Ⅲ卷 .40）图（a）中的三个 DNA 片段上依次表示出了 EcoR I 、BamH I 和 Sau3A I 三种限制性内切酶 的识别序列与切割位点， 图 （b ）为某种表达载体示意图 （载体上的 EcoR - 2 - / 7 I 、 Sau3A I 的切点是唯一的） 。 根据