组织dna提取原理和步骤详细.pptxVIP

组织DNA提取Tissue DNA Extraction/[实验目的]学习从生物组织中提取DNA，为研究DNA的理化性质与结构功能打好基础。上海交通大学医学院提取DNA总的原则：1 保证核酸一级结构的完整性；2 其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；3 核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；4 其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。上海交通大学医学院原理：粉碎组织DNP 裂解液 裂解细胞膜、核膜DNP 苯酚、氯仿? DNA（RNA） RNA酶 Protase Ｋ 苯酚、乙醇?纯DNA 紫外定量上海交通大学医学院各种组织细胞破碎方法细胞破碎方法 应用 Ⅰ机械法1匀浆法机体软组织2捣碎法动物韧性组织3研磨法细菌、酵母 Ⅱ物理法1超声法细胞混悬液2反复冻融法培养细胞3冷热交替法细菌、病毒4低渗裂解红细胞 Ⅲ化学法1有机溶剂细菌、酵母2去垢剂组织、培养细胞3酶解法细菌、酵母上海交通大学医学院破裂细胞 、释放核酸上海交通大学医学院DNA酚抽提法示意图上海交通大学医学院DNA鉴定(DNA identification) 浓度鉴定(concentration) 纯度鉴定(purity) 完整性鉴定(integrity)上海交通大学医学院浓度鉴定(concentration identification)1）紫外分光光度法(ultraviol