青霉素生产工艺57652.pptVIP

青霉素发酵生产工艺 青霉素发酵生产工艺 菌种 发酵工艺流程 培养基 发酵培养控制 提取精制 青霉素类抗生素 青霉素(Penicillin)又称盘尼西林，是人类发现的第一种抗生素，也是目前全球销量最大的抗生素。 青霉素是β-内酰胺类抗生素中的一类，是分子中含有青霉烷、能破坏细菌细胞壁并在细菌细胞的系列生长期起杀菌作用的一类抗生素。 一种高效、低毒、临床应用广泛的重要抗生素。它的研制成功大大增强了人类抵抗细菌性感染的能力，带动了抗生素家族的诞生。 青霉素的化学结构 青霉素是β-内酰胺类抗生素中的一类，具有β-内酰胺环结构；是分子中含有青霉素母核（青霉烷）的多种化合物的总称。 青霉素发酵生产工艺 青霉素制备的一般流程图 菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液预处理及种子加滤 提取及精制 成品检验 成品包装 菌种 目前国内青霉素生产菌按其在深层培养中菌丝的形态分为丝状菌和球状菌两种，根据丝状菌产生孢子的颜色又分为黄孢子丝状菌和绿孢子丝状菌，常用菌种为绿孢子丝状菌，如产黄青霉素。 菌种 青霉素最初生产菌为音符型青霉菌，生产能力仅为几十个单位，不能满足工业生产需要。后来发现适合深层培养的新菌种——产黄青霉，生产能力100U/ml，经不断诱变选育，目前平均生产能力66000-70000U/ml，国际最高生产能力已超100000U/ml。 青霉素产生菌的生长过程 分生孢子发芽期 菌丝繁殖期 脂肪粒形成期 脂肪粒减少，小空孢 大空孢 自溶 1－4期为菌丝生长期，3期的菌体适宜为种子。4－5期为生产期，生产能力最强，通过工程措施，延长此期，获得高产。在第六期到来之前结束发酵。 青霉素的发酵 发酵工艺控制： 1.基质浓度  2.培养基成分的控制 3.温度 4. pH 值、溶氧 5.菌丝状态 6.泡沫的控制 发酵工艺控制 B.氮源： 主要有机氮源为玉米浆、棉籽饼粉、花生饼粉、酵母粉、蛋白胨等。 玉米浆为较理想的氮源，含固体量少，有利于通气及氧的传递，因而利用率较高。 有机氮源还可以提供一部分有机磷，供菌体生长。无机氮如硝酸盐、尿素、硫酸铵等可适量使用。 发酵工艺控制 C.无机盐： 碳酸钙用来中和发酵过程中产生的杂酸，并控制发酵液的pH值 为菌体提供营养的无机磷源一般采用磷酸二氢钾。 另外加入硫代硫酸钠或硫酸钠以提供青霉素分子中所需的硫。 铁离子对青霉素有毒害作用，应严格控制发酵液中铁含量在30ug/mL以下。现在还有一些工厂采用铁罐发酵，在发酵过程中铁离子便逐渐进入发酵液；发酵时间愈长，则铁离子愈多。铁离子在50μg/ml以上便会影响青霉素的合成。所以青霉素的发酵罐采用不锈钢制造为宜。 发酵工艺控制 D.前体： 前体的加入是青霉素发酵的关键问题之一。 添加苯乙酸或者苯乙酰胺，可以借酰基转移的作用，将苯乙酸转入青霉素分子，提高青霉素G的生产强度。 但苯乙酸对发酵有影响，一般以苯乙酰胺较好。 也有采用苯乙酸月桂醇酯，其优点是在发酵中月桂醇酯水解，苯乙酸结合进青霉素成品。而月桂酸作为细菌营养剂及发酵液消沫剂，且其毒性比苯乙酸小，但价格较贵。 前体要在发酵开始20h后加入，并在整个发酵过程中控制在50μg/ml左右。前体用量大于0.1%时，青霉素的生物合成均下降。所以一般发酵液中前体浓度以始终维持在0.1%为宜。 染 菌 处 理 染菌是发酵工业长期以来不能彻底解决的问题，因此如何解决染菌问题就成了发酵工业的工作重点之一。要解决染菌问题首要问题就是要能检测出是否染菌。  染菌通常通过三个途径发现：无菌试验，发酵液直接镜检，发酵液的生化分析。其中无菌试验是判断染菌的主要依据。 染 菌 的 处 理 染菌在发酵过程的每个阶段都可能发生，下面就各个不同的阶段的染菌情况和处理办法一一说明。 ⒈种子培养期染菌 ⒉发酵前期染菌 ⒊发酵中期染菌 ⒋发酵后期染菌 染 菌 的 处