实验中常用蛋白检测方法.pptVIP

实验中常用蛋白检测方法 实验中常用蛋白检测方法 蛋白的检测方法 实验中常用蛋白检测方法 Western Blot 免疫荧光 ELISA 免疫组化 实验中常用蛋白检测方法 Western Blot 原理：经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到PVDF膜上（以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变）。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色、化学发光或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 特点：组织、细胞来源均可；半定量 实验中常用蛋白检测方法 原理：抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究。 特点：是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和组织学技术（组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等），通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织（细胞）内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。 免疫组化/免疫荧光 实验中常用蛋白检测方法 原理：酶联免疫法，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。 特点：免疫学原理