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20份欧洲型黄瓜种质资源的半致死温度与耐热性研究
摘要:为探讨不同欧洲型黄瓜种质资源对高温的适应性差异,为耐热种质资源筛选及耐热机理的深入研究提供理论和实践依据,以20份欧洲型黄瓜的叶片为材料,设置6个高温处理,以室温为对照,测定浸提液电导率值并计算相对电导率,通过拟合Logistic方程,计算半致死温度(LT50)。试验结果表明,随着温度升高,相对电导率呈S型曲线,且相对电导率与处理温度存在显著的直线相关关系,通过计算S型曲线拐点求得20份欧洲型黄瓜的半致死温度在45~51℃,其中33-2的半致死温度最高,达到50.09℃,37-1的半致死温度最低,为45.82℃。20份欧洲型黄瓜的耐高温能力由强到弱依次为33-2gt;75-2gt;32-2gt;33-1gt;11-2gt;31-2gt;09-2gt;36-2gt;76-1gt;36-1gt;37-2gt;10-1gt;35-2gt;76-2gt;11-1gt;43-2gt;35-1gt;75-1gt;32-1gt;37-1。因此,半致死温度可作为评价欧洲型黄瓜耐热性的一个可靠指标。 关键词:欧洲型黄瓜;耐热性;半致死温度;相对电导率 欧洲型黄瓜是一类温室专用型黄瓜,由于营养和经济价值高,其栽培面积逐年增加,与华南、华北型黄瓜不相上下。黄瓜性喜温,不耐热,温度逆境为害一直是其研究热点,但主要研究的是黄瓜的耐低温和冷害机制,针对高温胁迫的研究结果较少[1]。可是,随着全球气候变暖对农业生产影响日趋严重,生产上高温胁迫造成的为害不容忽视,耐热性研究逐渐成为热点之一。 在黄瓜耐热性方面,国内外学者研究发现,黄瓜可以通过调节细胞内脯氨酸、丙二醛、热休克蛋白(HPS)以及各类酶的含量,来缓解高温热害对植株的伤害[2]。但目前对黄瓜在高温下生理生化指标的变化及其耐热生理机制的研究还不深入,如目前还没有确立一个准确恰当的黄瓜耐热性鉴定方法,使得黄瓜耐热性遗传机制的研究无法深化。 处理黄瓜高温热害的方法有2种,一是采用适宜的栽培措施,如高温炼苗、冷凉灌溉、遮阳网遮阳、通风降温、整枝打杈和化学处理等,二是选育耐高温的优良品种。第一种方法必须投入充足的财力、人力和物力,生产成本的加大会导致经济效益的下降。因而解决高温伤害的有效途径是培育优良的耐热品种[3]。对20份欧洲型黄瓜品系的半致死温度进行测定,探讨不同品种的耐热性,旨在为将半致死温度这一指标应用于欧洲型黄瓜种质资源筛选和耐热性机理的深入研究提供理论和实践依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试材料均为云南思农蔬菜种业发展责任有限公司从荷兰引进的品种,经过杂交分离筛选,5~6代自交后得到的高代自交系,20份高代自交系都是欧洲生态型黄瓜,具体见表1。 1.2 试验方法 试验在云南省农业科学院热区生态农业研究所实验室进行。2013年12月15日播种,采用培养皿催芽法,将滤纸用蒸馏水润湿后放入干净的培养皿中,其后将浸泡吸水6 h的种子均匀地放在滤纸上,然后盖上培养皿盖,置于人工气候箱催芽。将出芽整齐一致的种子播于50孔塑料穴盘中,每穴1株,置于温度25℃、光照14 h、黑暗10 h、光照强度 6 000 lx,平均湿度75%~80%的人工气候箱中培养。待幼苗长到4叶1心且第3片真叶展开时,选择长势均匀一致的幼苗备用。从中选取3株并取同一部位的功能叶,用去离子水冲洗干净,剪成0.5 m2的小块,去掉中脉,称取0.1 g装入加有20 mL去离子水的带塞试管中,用真空泵抽气30 min后盖上试管塞。将试管分别放入40、45、50、55、60、65℃的水浴锅中,以室温为对照,水浴 30 min,取出后冷却2 h至室温,用电导率仪测定浸提液电导率值(Ta)。然后再将试管放入100℃沸水中水浴30 min,高温杀死植物组织,取出后冷却2 h至室温,用电导率仪测定浸提液电导率值(Tb)。重复3次,取平均值。相对电导率计算公式为:相对电导率(L)=(Ta/Tb)100%,其中,L:处理叶片的相对电导率(%);Ta:处理叶片的初电导率值;Tb:处理叶片的终电导率值[4,5]。 1.3 数据分析方法 利用SPSS 16.0和Excel 2007软件进行数据分析,采用LSD法进行多重比较。 2 结果与分析 2.1 不同处理温度与相对电导率的关系 如图1所示,20个欧洲型黄瓜叶片的相对电导率均表现出增加的趋势,而且增长趋势呈缓慢增加迅速增加缓慢增加的典型S型变化。但是,不同品系的欧洲型黄瓜叶片的相对电导率快速增加时的处理高温又各不相同,33-2、75-2、11-2的相对电导率迅速上升时的处理高温在52℃左右,其余品系相对电导率迅速上升时的处理高温在47℃左右。处理高温升至57℃左右时各品系相对电
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