不同种植年限苜蓿地亚硝化菌、反硝化菌和固氮菌的垂直分布.docxVIP

不同种植年限苜蓿地亚硝化菌、反硝化菌和固氮菌的垂直分布 不同种植年限苜蓿地亚硝化菌、反硝化菌和固氮菌的垂直分布 苜蓿是世界上栽培最早、面积最广的多年生豆科植物[1]，是一种优质、高产、高蛋白、适应性强的豆科牧草，它在传统农业中发挥着提供饲草和培肥土壤的作用。长期以来人们对苜蓿的营养价值和产量等方面进行了大量的研究[2-4]。不同种植年限的苜蓿使土壤理化性质和生物学性状发生了不同的变化，在一定程度上影响了土壤的肥力状况，进而影响到了其营养价值、产草量等问题。土壤微生物是土壤生态系统中极其重要和最为活跃的部分[5]，在土壤养分转化循环，系统稳定性和抗干扰能力以及土壤可持续生产力中占据主导地位[6，7]，因此土壤微生物种类、数量及其变化在一定程度上反映了土壤有机质的矿化速度以及各种养分的存在状态，从而直接影响土壤供肥状况[8]。目前，关于研究不同种植年限苜蓿地参与氮素循环的微生物生理群的分布特征研究较少，对不同种植年限苜蓿地的亚硝化细菌、反硝化细菌和固氮菌分布特征的研究更少，研究这些土壤微生物目的在于培肥土壤和实现土壤可持续利用提供科学依据。 　　1材料与方法  　　11材料  　　试验地点位于西辽河平原内蒙古民族大学试验农场，土壤类型为灰色草甸土，苜蓿品种为阿尔冈金，试验对象为2年生和5年生苜蓿，栽培管理一致，对照为毗邻试验田的非苜蓿地。2006年4月9日和5月23日先后两次对2年生、5年生苜蓿地和对照地块分别按0～10cm，10～20cm，20～30cm和30～40cm 4个土层分层采样，3次重复，采集土壤样品装入灭菌处理过的聚乙烯袋中于实验室4℃低温保存，以备用。试验固氮菌采用改良瓦克斯曼（Waksman）77号培养基，亚硝酸细菌采用改良的斯蒂芬遜（Stephenson）培养基，反硝化细菌采用培养基4[9]。  　　12方法  　　固氮菌采用固体平板法计数，亚硝酸细菌和反硝化细菌采用稀释法[9]，固氮菌改良瓦克斯曼77号培养基在28～30℃恒温箱中培养7天计数，亚硝酸细菌改良的斯蒂芬逊培养基和反硝化细菌培养基在28～30℃恒温箱中培养14天计数，查表后换算成每克干土的含菌数。  　　2结果与分析  　　21土壤亚硝酸细菌  　　土壤的硝化作用是在硝化细菌作用下将氨转化成硝酸的过程，土壤中硝化细菌的多少反映了土壤硝态氮的供应状况。土壤中硝化细菌数量的测定通常只测定亚硝酸细菌的数量，原因在于土壤中硝化作用的第一阶段和第二阶段是连续进行的，一般很少有亚硝酸盐的累积，所以测定参与第一阶段的亚硝酸细菌的数量，就能反映出硝化细菌的多少。由表1可以看出，0～40cm的4个土层中，苜蓿地的每个土层在4月份亚硝酸细菌都高本文由收集整理于对照的每个相应土层3个数量级，在5月份的亚硝酸细菌低于对照的每个相应土层1个数量级。2年生苜蓿地的亚硝酸细菌数量多于对照，5年生苜蓿地的亚硝酸细菌数量少于对照。  　　从总体上看苜蓿地的亚硝酸细菌在4月份明显高于5月份，2年生苜蓿地亚硝酸细菌数量从上到下4个土层在4月份先减后增，5月份逐渐减少呈下降趋势。5年生苜蓿地亚硝酸细菌数量从上到下呈先升高后下降的趋势。2年生苜蓿地中亚硝酸细菌在4月份的20～30cm土层所占比例最大，在30～40cm土层所占比例最小，5月份的亚硝酸细菌在0～10cm土层所占比例最大，30～40cm土层中比例最小。5年生苜蓿地中，亚硝酸细菌数4月份在0～10cm土层所占比例最小，5月份在10～20cm土层所占比例最大。