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选修一：微生物的分离和培养 一、知识梳理 1．相关技能、技术和方法 (1)无菌操作的技能 ①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在 内，在 ℃下加热 h以达到灭菌的目的。 ②湿热灭菌法常采 进行，其使用包括加水、 、 、 、出锅等步骤。 (2)培养基的配制 ①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物 的营养基质。 ②营养组成：一般都含有 、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入 等特殊的营养物质，并要调节培养基中 使之满足微生物生长的需要。 ③种类： 培养基和 培养基，前者的主要优点是 ，缺点是营养成分 ；后者的优点是 ，缺点是配 。 (3)微生物的接种 ①接种：是指在 条件下将微生物接入 的操作过程。 ②常用的工具有 等，在涂布平板接种时要用 ，穿刺接种时要用接种针，在 或在固体培养基平板上进行 时要用接种环。 2．大肠杆菌的接种与分离培养 (1)配制牛肉膏蛋白胨培养基 其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。 (2)斜面接种和培养大肠杆菌 ①主要目的： 、 和 等。 ②主要步骤：准备接种→ → →挑取少许菌种→ →在 中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 ℃)保存。 (3)平板划线分离和培养大肠杆菌 ①平板制作的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程： 。 b．甲、乙、丙中的灭菌方法是 。 c．丁中的操作需要等待 后才能进行。 ②平板划线法是指用带有微生物的 在平板培养基表面通过 而纯化分离微生物的一种方法。 二、课时训练 1、下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ） A．将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 2．有关倒平板的操作错误的是（ ） Ａ．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 3.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ） Ａ．先将菌液进行一系列的梯度稀释 Ｂ．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 Ｃ．适宜条件下培养 D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落 4．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ） A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色 C．有无鞭毛 D．培养基的不同 5．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　) A．接种环、手、培养基 B．高压锅、手、接种环 C．培养基、手、接种环 D．接种环、手、高压锅 6．下图中甲是涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。 下列叙述中错误的是(　　) A．甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液 B．对于浓度较高的菌液，如甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成 C．乙培养皿中所得的菌落都符合要求 D．乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 7、请回答下列微生物培养与应用的有关问题： （1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。 （3）若用