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微柱凝胶法
1标本:EDTA-K2 抗凝血2.0ml
2原理:
2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应(其本质为血凝反应);
2.2检测系统是在微柱中(载体)装有的介质凝胶;
2.3凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞(结合的)被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红细胞(即未结合、游离的)通过离心后沉入微柱的底部;
2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原,从而鉴定红细胞的血型。?
3操作:
3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞,在B孔悬空加入50ul标准B红细胞,再在两孔中各加入50ul样品血浆。
3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入?5%病人红细胞悬液10ul
3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟
3.4离心结束后在白色背景前观察结果
4结果判断:
A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型;
A孔阴性B孔阴性为O型;A孔阳性B孔阳性为AB型。
凝集强度
描 述
阴性
100%(全部)的红细胞沉在微管的底部
+/-
100%(全部)的红细胞沉在微管的下端1/3之内
1+
80%(大部分)的红细胞沉在微管的下端2/3之内
2+
80%(大部分)的红细胞沉在微管的上端2/3之内
3+
80%(大部分)的红细胞沉在微管的上端1/3之内
4+
凝集的细胞处于微管的顶部
DP(双群)
红细胞同时位于微管上部和微管底部
H(溶血)
微管中液体出现透明红色
5.注意事项
5.1严格按操作规程操作,认真核对标本并作好标记。
?5.2应先加红细胞悬液,然后再加血浆。?
?5.3为了防止冷凝集现象的干扰,一般应在室温下进行试验。
5.4严格控制离心速度和时间,防止假阳性或假阴性结果。
5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存,用完后放4℃冰箱保存1周。?
5.6判断结果后应仔细核对,记录,避免笔误。
6.方法评价
卡式法定型使用安全,操作简单,结果稳定可靠,灵敏度高,重复性好,但费用昂贵,需要特殊的仪器设备。
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