细胞DNA提取步骤.docVIP

细胞DNA提取步骤 HCT116细胞吸去培养基，PBS洗两次。 胰酶消化2min。 2ml培养基终止消化。 全部吸入15ml离心管中，离心300G3min。 弃去上清，用3ml冷的（4°）PBS重悬，离心。 200ul冷（4°）PBS重悬，转入1.5mlEP管，加入25ul的OB，涡旋混匀。 加入220ul的BL，70°孵育10min。（期间短暂的涡旋几次）。 加入220ul的无水乙醇，涡旋混匀。 把液体全部转入柱子中（已套收集管），离心10000rpm，1min。 弃滤液，加入500ul的HBC（已加异丙醇），离心10000rpm，1min。 弃滤液，加入500ul的DNA Wash Buffer（已加无水乙醇），离心10000rpm，1min。两次。 柱子室温干燥2min。 弃套管，柱子转到1.5ml 微量离心管上，加入70ul的Elution Buffer（于70°提前预热）， 70°孵育2min，10000rpm，1min。洗脱两次。 14.于–20°保存。