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基因工程
考点解读
1、识记:基因工程的诞生、基因工程的原理及技术、基因工程的延伸(蛋白质工程
2、理解:基因工程的应用
说明:本专题内容近年来一直为江苏高考所看重,命题出手很重,涉及到难以理解的以下几个问题,限制
酶(一种或两种 对 DNA 分子(线性或环状)的切割、拼接。在本专题的复习中,需要用心去体会。
基础知识回顾
1、基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 和 ,赋予生
物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在
水平上进行设计和施工的,因此又叫做 。
2、基因工程的分子手术刀
①切割 DNA 的工具是 ,作用于 DNA 分子的什么部位?
②这类酶在微生物体内的作用可能是什么?
③由于这种切割作用是在 DNA 分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶(简称限制酶 。这种酶作用的特
点是:一种限制酶 。
④DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段,末端通常有两种形式,即 和 。
3、分子缝合针
一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E coli DNA 连接酶。E coli DNA 连接酶只能将
连接起来,不能将双链 DNA 片段平末端之间进行连接。另一类是从
分离出来的,称为 T DNA 连接酶。T DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的
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,又可以 “缝合”双链 DNA 片段的 ,但连接 之间的效率比较低。请比较
DNA 连接酶与 DNA 聚合酶不同之处:
4、分子运输车
①基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去(或停留
在细胞中自我复制,或 ;二是利用它在宿主细胞内对目的基因
进行大量的复制。
②现在通常使用的载体是 ,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核 DNA 之外的环状 DNA,
有的细菌中有一个,有的细菌中有多个。
③其他载体还有 和 等。有人认为线粒体也可以作为载体使用,究
其原因,可以概括为
④作为载体必须具备以下条件:
能够在宿主细胞中 ,具有 个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某
些 ,便于进行筛选,如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。
还有一点值得强调,由于载体是携带外源基因进入受体细胞的,因此必须要保证运用的载体对
没有毒害作用。
5、目的基因的获取:
1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的 。
2.获取目的基因的方法
(1 从基因文库中获取目的基因
①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 ,导人受体菌的群体中 ,各个受体菌分别
含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
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基因组文库:含有一种生物的 基因
②种类:
cDNA 文库:含有一种生物的 基因
③目的基因的获取
根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的
产物 mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。
(2 利用 PCR 技术扩增目的基因
(3 人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。
6、基因表达载体的构建(基因工程的核心步骤
1.表达载体的组成:目的基
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