高三生物选修3专题13知识点总结.pdfVIP

核心出品 必属精品 免费下载 生物：《现代生物科技专题》专题 1-3 知识点总结 一、 基因工程 1、（a）基因工程的诞生 （一）基因工程的概念基因工程是指按照 人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术， 赋予 生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型 和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的， 又叫做 DNA 重组技术。 2 、（a）基因工程的原理及技术 原理： 因重组 技术：（一）基因工程的基本工具 1. “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离 纯化出来的。 （2 ）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的 核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位 的两个核苷酸之间的磷酸 二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2. “分子缝合针” ——DNA 连接酶 (1) 两种 DNA 连接酶（E ·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别： E ·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，只能将双链 DNA 片段互补 的黏性末端之间的 磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合 两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2) 与 DNA 聚合酶作 用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的 末端， 形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末 端，形成磷酸二酯键。 3. “分子运输车”——载体 （1）载体具备 的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶 切点， 供外源 DNA 片段插入。③具有标记基因，供重组 DNA 的 鉴定和选择。 （2 ）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简 单的、独立于细菌染色体之外，并具 有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。 （3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二) 基因工程的基本操作程序 2 / 11 第一步：目的基因的获取 1. 目的 因是指： 编码蛋白质的结构基因 。 2.原核基因采取直接分离获得， 真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转 录法_和 化学合成法_ 。 3.PCR 技术扩增目的基因 （1）原理：DNA 双链 复制 （2 ）过程：第一步：加热至 90～95℃DNA 解链；第二步：冷 却到 55～60℃，引物结合到互 补DNA 链；第三步：加热至 70～75℃， 热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：基因表达 载体的构建 1. 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以 遗传至下一代，使目的基因能够表达 和发挥作用。 2.组成：目的 因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合 的部位， 能驱动基因转录出mRNA ，最终获得所需的蛋白质。 （2 ）终止子： 也是一段有特殊结构的 DNA 片段 ，位于基因的尾端。 （3）标记 基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有 目的基因的 细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三 步：将目的基因导入