抗菌多肽药物的制备方法.docx

目录 10459 抗菌多肽药物的制备方法 2 14951 第一章 文献综述 4 16982 1.1抗菌肽的分类 4 9713 1.2抗菌肽的性质 5 30494 1.2.1抗菌肽的一般理化性质 5 9923 1.2.2抗菌肽的生物学特性 5 10813 1.3抗菌肽的作用机理 5 896 1.4抗菌肽的制备方法 6 15313 1.4.1生物材料提取法 6 14594 1.4.2化学合成法 6 14263 1.4.3基因工程法 6 24237 1.4.4酶解法 7 11962 1.5抗菌肽在各方面的应用前景及目前存在的问题 7 9527 1.5.1抗菌肽在医疗方面的应用 7 11652 1.5.2抗菌肽在食品方面的应用 8 12866 1.5.3抗菌肽在禽畜养殖业方面的应用 8 26695 1.5.5抗菌肽研究存在的问题 8 25065 1.6基因工程制备抗菌肽简介 9 10399 1.6.1抗菌肽分子设计及改造策略 9 26013 1.6.2目的基因的获取 12 14191 1.6.3制备重组抗菌肽 12 13062 第二章 抗菌多肽的制备工艺 14 2766 2.1目前抗菌多肽的生产方法 14 2750 2.2抗菌肽制备改造设计 16 67 2.2.1抗菌肽改造的原因 16 24103 2.2.2抗菌肽改造的方法 17 28117 2.2.3抗菌肽改造的依据 17 21673 图2 抗菌肽的筛选 18 26821 2.3抗菌肽的筛选 19 29718 2.3.1通过生物信息学工具优化抗菌肽结构参数 19 22249 2.3.2抗菌肽的合成、纯化 19 19724 2.3.3抗菌肽的活性检测 20 18428 2.3.4抗菌肽的结构检测 20 21390 2.4宿主菌的育种车间工艺流程及主要设备 22 15975 2.4.1主要设备以及用途： 22 3362 2.4.2制备基因 22 2888 2.4.3构建重组表达载体 23 18753 2.4.4目的基因片段与载体的连接 23 16326 2.4.5宿主菌的制备 23 32215 2.4.6连接产物转入大肠杆菌 24 1524 2. 4.7 筛选 24 28959 2.5抗菌肽的表达、纯化及分离的工艺流程及主要设备 24 1483 2.5.1主要设备及其用途： 24 25389 2.5.2重组质粒在大肠杆菌中的表达 24 24330 2.5.3融合蛋白的表达及制备 25 15574 2.5.4抗菌肽的切割和纯化 25 18171 2.6抗菌肽抗菌活性的检测 25 14046 第三章 抗菌肽药物的前景展望 26 抗菌多肽药物的制备方法 摘要 抗菌多肽是抗生素的一种。近年来，抗生素的滥用导致抗生素的耐药性是一个急需解决的问题，而抗菌多肽药物具有抗菌谱广，作用强且迅速，不易产生耐药等优点；这些优点，使得抗菌肽类药物有巨大的被开发价值，并具有成为最有可能取代其他抗生素的新型抗菌药物的潜能。虽然抗菌肽的来源非常广泛，可以来源于动物，植物，微生物等；但是抗菌肽的工艺化生产还有许多问题需要解决。在天然抗菌肽很少，人工合成抗菌肽成本太高的形势下，寻找一个能大量合成抗菌肽，并且成本相对比较低的抗菌肽的制备方法是本文的目的。本文通过查阅大量的相关文献，综合实际情况，选择使用DNA合成仪合成抗菌肽基因，以大肠杆菌作为表达系统并通过融合表达的方式来生产抗菌肽。根据大肠杆菌密码子偏爱性和稀有密码子改造抗菌肽基因， 首先以数据库作为理论基础，以计算机软件作为理论辅助，理论上筛选出抗菌活性的抗菌肽，再通过实验来进一步筛选，最终选出最优异的抗菌基因，然后通过基因工程制备出抗菌肽；最后通过TTC微量稀释法检测抗菌肽抑菌活性。 关键词：抗菌多肽；生产工艺；基因工程；抑菌活性； Abstract Antimicrobial peptides are members of the antibiotic family. In recent years, an urgent problem is that the overuse of antibiotics leads to antibiotic resistance. Antimicrobial peptides have many important advantages such as broad spectrum antimicrobial, strong and fast effect, and uneasy to produce drug resistance. These advantages make antimicrobi