动物生化第九章核酸的生物学功能1课件.ppt

第九章 核酸的生物学功能;讲授内容;教学目标;第一节 DNA的生物合成;一、 DNA的复制;半 保 留 复 制;DNA合成的同位素示踪实验 1958，Meselson和Stahl 大肠杆菌 15NH4CI为唯一氮源的培养液中生长若干代 被15N标记的大肠杆菌转入14NH4CI为唯一氮源的培养液中 完成第一代和第二代繁殖时，分离DNA，密度梯度超速离心 被15N标记的亲代双链DNA（记作15N/15N）密度大，在下部；14N/14N密度小，在上部；15N/14N在15N/15N和14N/14N之间;（二） DNA复制开始于特定的起点;原核生物与真核生物DNA合成区别;DNA的复制总是由5`向3 `方向进行 前导链(leading strand) 以3‘→5’方向的母链为模板，连续复制合成的一条5‘→3’方向的链 随后链 另一条母链DNA是5‘→3’方向，它作为模板时，复制合成许多条不连续的5‘→3’方向的短链;DNA复制的过程;;（四） DNA复制相关的酶和蛋白质;（1） DNA聚合酶;;由DNA聚合酶催化的链延长反应;;;2．引物酶 ;引物及引物酶的作用; 3.DNA连接酶;;;;二、DNA的损伤和修复; （一） DNA的损伤;;胸腺嘧啶二聚体;（二） 损伤修复系统 ;光修复;暗修复;切除修复;2．重组修复 ;重组修复的结果;3．SOS修复 ;三、RNA指导下的DNA合成; 反转录酶 ; 逆转录病毒的生活周期 ;四、多聚酶链式反应（PCR） ;PCR反应的步骤;;PCR反应的结果;PCR的特点 ;PCR技术的应用 ;五、DNA核苷酸顺序测定;Sanger法的程序;2’，3’-二脱氧核苷三磷酸结构图;Sanger法的结果分析;;第二节 RNA的生物合成 ; 一、转 录;（一） DNA的大小与基因;重复基因 ;基因重叠 ;不连续基因;;;;（二）双链DNA中仅有一段被转录;（三）RNA聚合酶;;RNA聚合酶的结构组成;（四）DNA模板上的启动子; 启动子中不同顺序的作用;启动子处的反应;（五）延长在转录鼓泡上进行; RNA-DNA杂交链的长度;;转录的错误频率;（六）转录终止;二、RNA转录后的加工成熟; 1. 原核生物的mRNA成熟过程;2.原核生物的tRNA成熟过程;;稀有碱基;3. 原核生物的rRNA成熟过程;由16sRNA、tRNA谷、23sRNA、5sRNA和tRNA色以及在远端的另一个tRNA天冬等组成; 三、真核生物中的转录;1．真核生物中转录与翻译处在不同的区域;2．RNA聚合酶不相同;3．启动子不同;4．转录后RNA加工修饰不同;（1）mRNA加“帽子”和“尾巴”的修饰;帽子;mRNA3’末端的poly（A）结构;真核生物中mRNA的加“帽子”和“尾巴”的生物学意义;（2）mRNA的剪切加工;原核生物 真核生物;核不均一RNA;;;（3）rRNA 的剪切加工;（4）tRNA 的剪切加工;第三节 催化活性RNA的发现;一、T．Cech的发现;四膜虫核糖体RNA的前体长4.6kb，必须除去一段414bp的内含子，才能产生成熟的26srRNA。 塞克（T．Cech）及其同事发现只需核苷酸存在下，RNA就能剪接自身或自我剪切（self-splicing）。即RNA分子本身具有高度的专一性和催化活性。;其它催化活性RNA的发现 ;早期RNA世界;第四节 蛋白质的生物合成;蛋白质的生物合成概述;遗传信息是如何储藏在4种核苷酸中的？ 如何破译遗传密码？;遗传密码的破译;在试管中加入了ATP、游离的氨基酸、酶和核糖体及核糖体RNA——没有蛋白质的合成 问题：需要其他带有遗传信息的RNA？ ;不同的氨基酸分别加入到poly U试管系统中 5天通宵达旦 星期六早晨，熬红了眼的Matthei得到了答案：poly U合成的肽链全部是苯丙氨酸（Phe） 世界上破译第一个遗传密码的人;Nirenberg 莫斯科 第五届国际生物化学大会不善于推销自己 小组会上 Meselson认为非同小可 全体大会上重新做学术报告 ;1966年，Nirenberg和Khorana 全部遗传密码字典 64个密码子 61个负责20种氨基酸翻译， 3个终止密码子 Nirenberg 和 Khorana 1968年 诺贝尔奖;;遗传密码;（二） 遗传密码的主要特征;二、解码系统 ;三、核糖体 ; （一）核糖体的化学组成;真核生