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第 33 讲基因工程
一、考纲要求:
基因工程的诞生 ( Ⅰ) 。
基因工程的原理及技术 ( 含 PCR技术 )( Ⅱ) 。
基因工程的应用 ( Ⅱ) 。
蛋白质工程 ( Ⅰ) 。
实验: DNA的粗提取和鉴定。二、教学目标:
能简述基因工程的原理及技术;
能说出基因工程的基本工具;
能简述基因工程的操作步骤。
举例说出基因工程在农业、医疗、环境保护等方面的广泛应用及其发展前景。
举例说出蛋白质工程崛起的缘由。简述蛋白质工程的原理。素养培养目标:
1.生命观念:理解基因的结构与功能。
2.科学思维:建立基因工程的操作流程模型。
3.科学探究:理解基因工程的应用和蛋白质工程。
三、教学重、难点:
教学重点:
基因工程的基本原理,基因操作的工具,基本步骤及其应用。
蛋白质工程的原理及蛋白质工程的应用实例。
教学难点:
基因工程的基本原理,基因工程的应用及其安全性。
蛋白质工程的原理。
四、课时安排: 3 课时
五、教学过程:
考点一 基因工程的操作工具
(一)知识梳理: (学生自主看书填空、课堂学生间交流反馈纠正)
1.基因工程的概念
供体:提供目的基因。
操作环境:体外。
操作水平:分子水平。
原理:基因重组。
受体:表达目的基因。
本质:性状在受体体内的表达。
优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传性状。
2.DNA重组技术的基本工具
限制性核酸内切酶 ( 简称:限制酶 )
①来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用:识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果:产生黏性末端或平末端。
(2)DNA 连接酶
①作用:将限制酶切割下来的 DNA片段拼接成 DNA分子。
②类型
常用类型 E· coli DNA 连接酶 T4 DNA连接酶
来源 大肠杆菌 T4 噬菌体
功能 只缝合黏性末端 缝合黏性末端和平末端
结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
③DNA连接酶和限制酶的关系
归纳提升
与 DNA相关的五种酶的比较
名称
作用部位
作用结果
限制酶
磷酸二酯键
将 DNA切成两个片段
DNA连接酶
磷酸二酯键
将两个 DNA片段连接为一个 DNA分子
DNA聚合酶
磷酸二酯键
将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端
DNA (水解 )酶
磷酸二酯键
将 DNA片段水解为单个脱氧核苷酸
解旋酶
碱基对之间的氢键
将双链 DNA分子局部解旋为单链,形成两条长链
载体
①种类:质粒、 λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
能自我复制
②质粒的特点 有一个至多个限制酶切割位点
有特殊的标记基因
深化拓展 载体上标记基因的作用
载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。 目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。
当含有抗生素抗性基因的载体进入受体细胞后,抗性基因在受体细胞内表达,使受体细胞能够抵抗相应抗
生素,所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受体细胞,原理如下图所示:
(二)基础训练(课前完成,课上提问) :讲义 P257
(三)拓展(教师精讲)
下图中的图 1 和图 2 分别表示的是 EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶的作用示意图,据图分析:
请说出 EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶识别的碱基序列及切割的位点。
提示 EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是 GAATTC,切割位点在 G 和 A 之间; SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是
CCCGGG,切割位点在 G和 C 之间。
以上实例说明限制酶有何特性?
提示 说明限制酶具有专一性。
四、课堂精练:学生当堂完成,互评,教师协助
精练一工具酶的应用分析
1.下图是表达新基因用的质粒的示意图,若要将目的基因插入到质粒上的 A 处,则切割基因时可用的是
( C )
A.Hin dⅢ B. EcoRⅠ
C.EcoB D. PstⅠ
精练二载体的应用分析
质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示,通过标记基因可
以推知外源基因 ( 目的基因 ) 是否转移成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上的生长情况不同,
如图表示外源基因插入位置 ( 插入点有 a、b、c) ,请根据表中提供细菌的生长情况,推测①②③三种重组后
细菌的外源基因插入点,正确的一组是 ( A )
细菌在含氨苄青霉素培养基上生长情况
① 能生长
② 能生长
③ 不能生长
细菌在含四环素培养基上生长情况
能生长
不能生长
能生长
A.①是 c;②是 b;③是 a
B.①是 a 和 b;②是 a;③是 b
C.①是 a 和 b;②是 b;③是 a
D.①是 c;②是 a;③是 b
考点二 基因工程的操作过程与应用
(一)知识梳理: (学生自主看书填空、课堂学生间交
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