猪流性腹泻腹泻病毒的假病毒相关研究PDF.pdfVIP

书 山 有 路 猪流行性腹泻假病毒的研究 摘 要 猪流行性腹泻病毒（PEDV ）属于冠状病毒属，冠状病毒科，能够导致仔猪 严重腹泻，给养猪业带来重大的经济损失。S 蛋白作为PEDV 最主要的膜蛋白， 已有报道证实S 蛋白含有病毒感染细胞的抗原表位区，但关于S 蛋白介导PEDV 进入细胞还有待于进一步研究，故本主要通过构建PEDV S1 的伪型病毒研究富 含抗原表位区的S1 蛋白在PEDV 进入细胞中的作用。 本研究中，首先，为有效的检测PEDV ，利用Vero E6 繁殖的PEDV 做为抗 原，制备PEDV 全病毒多克隆抗体。利用ELISA 和间接免疫荧光对抗体的效价 和特异性进行检测，结果显示该多克隆抗体与PEDV 有很好的特异性反应。 其次，为研究PEDV 的感染特性，摒弃非同源细胞系，对PEDV 在猪小肠 上皮细胞（IEC ）上进行适应培养，通过在IEC 细胞中盲传10 代，对第 10 代病 毒液进行检测。反转录 PCR 、间接免疫荧光和电镜检查均证实PEDV 能够感染 IEC 细胞系，并稳定传代，故最终确定IEC 是PEDV 的易感细胞系。