兽医微生物学 课件 第三十二章 病毒与细胞的相互作用.ppt

兽医微生物学 ( 多媒体教学课件 ) 绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生 物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。 细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、 致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。 免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免 疫调节，免疫技术及应用等。 细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、 微生物学诊断和免疫防治等。 真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与 防治等。 病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病 性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。 实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备 及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药 敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定 等 。 内 容 简 介 课件 002 兽医微生物学教学课件 2 第二十九章 病毒的结构 第三十章 病毒的复制 第三十一章 病毒的遗传与进化 第三十二章 病毒的与细胞的相互作用 第三十三章 病毒的致病机理 第三十四章 双股 DNA 病毒 第三十五章 单股 DNA 病毒 第三十六章 具有反转录过程的病毒 第三十七章 双股 RNA 病毒 第三十八章 单负股病毒目 第三十九章 分节段的负股 RNA 病毒 第四十章 套式病毒目 第四十一章 其他正股 RNA 病毒 第四十二章 朊病毒 课件 002 兽医微生物学教学课件 3 第三十一章 病毒的遗传与进化（自学） 第三十二章 病毒与细胞的相互作用 第一节 病毒的培养 第二节 病毒与细胞的相互作用 课件 002 兽医微生物学教学课件 4 第一节 病毒的培养 病毒的培养繁殖只能在活细胞内进行，是以病毒 基因为模板，在酶的作用下，分别合成其基因及蛋 白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为 复 制 。常见的病毒培养方法有： 细胞（包括组织器官） 培养法；鸡胚培养法；实验动物培养法。 SPF 动物 或 SPF 鸡胚，仍常用于培养病毒，但病毒细胞培养发 展最快，重点介绍。 一、病毒细胞培养 1. 概念 将适宜组织中的细胞分散，在培养液中进行 细胞培养，再接种病毒，让病毒在细胞中繁殖来培 养病毒的方法。 课件 002 兽医微生物学教学课件 5 2. 用途 用于病毒学研究。分离病毒，病毒克隆纯 化，病毒病诊断及疫苗制备等。 3. 特点 一致性好，材料易得，易标准化试验，可 重复性好。可通过细胞病变判定病毒感染，也可结 合免疫学技术检测细胞内的病毒。 二、细胞培养类型 1. 原代细胞 动物组织经胰蛋白酶等消化、分散， 获得单个细胞悬液，再生长于培养器皿中。制备原 代细胞，肾和睾丸最为常用，以来源于 SPF 胚胎或 幼畜组织的细胞为好。 课件 002 兽医微生物学教学课件 6 2. 二倍体细胞株 将原代细胞单层消化分散成单个 细胞，继续培养传代，仍为二倍体。此种细胞数量 可扩大，对病毒的易感性无变化。从样本中分离培 养病毒，一般多采用此种细胞。 3. 传代细胞系 在体外培养液中可无限制分裂传代 的细胞。一般来源于肿瘤组织。有已建立的很多传 代细胞系，如 Hel6( 人子宫癌细胞 ) 、 Vero( 非洲绿猴 肾细胞 ) 、 PK-15( 猪肾细胞 ) 等。 优点： 传代及培养方便，使用广泛。 缺点： 对有的样本病毒不敏感；传代日久易被霉形 体污染或病毒隐性感染；有致肿瘤的潜在危险。 课件 002 兽医微生物学教学课件 7 三、细胞培养的方法 最常用的方法为 静置培养 及 旋转培养 。还可用 悬 浮培养 或 微载体培养 技术等。 1. 静置培养 将消化分散的细胞悬液分装于培养瓶 ( 管 ) 或培养板 ( 孔 ) ，封闭，静置于恒温箱内，数天 后细胞可生成贴壁的单层细胞。如用细胞培养板， 一般需培养在含 5 ％的 CO2 条件下。哺乳动物及禽 类的细胞培养温度一般为 37 ℃ 。 2. 旋转培养