AlphaLISA均相酶联免疫分析技术.docVIP

AlphaLISA ——不需洗涤的ELISA 向所有的洗涤步骤 说 BYE AlphaLISA 技术原理 AlphaLISA 技术主要依赖于Alpha 供体微珠和受体微珠的相互作用。当生物反应使供体微珠和受体微珠相互接近时, 激光激发级联反应，从而产生极大放大的信号。具体来说，在680nm 的激光照射下, 供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧。单体氧扩散至受体微珠，产生一系列的化学发光反应，最后将能量传递到铕，发射波长为615nm 。在生物分子不存在特异的互相作用时，单体氧无法扩散到受体微珠，则不会有信号的产生。 长波长的激发光确保生物分子 和实验成分的干扰非常少 单体氧分子在溶液中可扩散200nm ，可检测非常大的生物分子。 供体微珠含有高密度的光敏剂，每个微珠每秒可产生多达60000个单体氧分子，极大地扩增了信号，从而使检测灵敏度达到attomole 水平 受体微珠上含有二甲噻吩衍 生物， 同单体氧反应，产生一系列化学发光反应，最后将能量转移到615nm 。该反应的半衰期为0.3秒，可使用时间分辨的方法检测 AlphaLISA 技术的优势 生物大分子和复杂互相作用的检测——供体和受体的距离可达200nm Alpha 供体微珠和受体微珠在小于200nm 的范围内都可被检测到，可以检测完整蛋白质、酶复合体、噬菌体等非常复杂的复合物和相互作用。而其它均相