临床免疫学检验 课件 第16章 细胞因子与细胞粘附因子的测定52.pptVIP

二、免疫学测定法 ? ELISA ? 化学发光酶免疫实验 ? 流式细胞术 ? ELISPOT ( 一 ) ELISA 方法 ? 用于细胞因子、可溶性细胞因子受体或可溶性粘附因子 的定性或定量测定。 ? 基本方法有： 双抗体夹心法、间接法和抗原竞争法 。 双 抗体夹心法是细胞因子测定的最常用方法。 ? 特点： ? 优点：批量检测，成本低廉，易推广，操作简单； ? 缺点：灵敏度低，不能区分生物学活性。 1. 检测标本： （ 1 ）血清、关节液、胸腔液、脑脊液或腹腔液等体液： ? 用于细胞因子、可溶性黏附分子、可溶性细胞因子受体等的检测 ? 正常情况下，血清中多数细胞因子含量均低，可选用敏感性高的 流式细胞术； ? 在 病理状态 下，细胞因子或可溶性黏附分子表达增加， 首选 ELISA 法。 ( 一 ) ELISA 方法 ? 只用于细胞因子和可溶性细胞因子受体的检测。 ? 检测时注意检测条件： ? 选择适当刺激剂： 不同刺激剂对细胞因子促分泌效应不同； ? 适时检测： 细胞生长状态和细胞因子分泌动态变化； ? 选择适当的检测时点： 最大分泌峰时间各异； （ 2 ）细胞体外培养后上清液 ( 一 ) ELISA 方法 ? 标本严重溶血： 血红蛋白的血红素基团的过氧化物酶活性干扰 ?