γδT细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响.docVIP

???? γδT细胞及其培养上清成份对骨髓?造血细胞集落形成的影响 ???? ????【摘要】　目的　研究γδT细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响。方法　运用体外半固体造血集落培养观察了人γδT细胞及其分泌上清对自体骨髓造血集落(CFU-C)形成的影响。结果　γδT细胞及其培养上清能刺激自体骨髓造血集落的形成；其培养上清中可检出IFN-γ、TNF、IL-8等细胞因子。结论　γδT细胞能分泌一系列具有不同效应的造血调控因子，但其共同的作用结果则具有一定的造血刺激效应,可能成为一种新型的CTL用于肿瘤的过继免疫疗法。　　【主题词】　γδT细胞　　造血集落培养　　过继免疫治疗 Study on modulatory role of γδT cell and its supernatant for hematopoiesis JIANG Xiaofeng, XIE Wei, WANG Yuedan, et al. Immunology Research Unit, Suzhou Medical College, Suzhou 215007 　　【Abstract】　Objective　To study the modulatory role of the γδT cell form human peripheral blood on growth of autologous bone marrow progenitors (CFU-C) and the levels of the cytokines in γδT cell supernatant. Methods　By making use of cultures for colonies of hematopoiesis with semi-solid medium, the effects of human γδT cells and its supernatant on the formation of CFU-C were observed. Results　It showed that γδT cell or its supernatant could stimulate CFU-C formation in the system without external cytokines, although the CFU-C numbers was lower. Meanwhile, high levels of cytokines were detected in γδT cell supernatant. Conclusion　These results strongly support the implication possibility of γδT cell on tumor immunotherapy and bone marrow purification.　　【Subject words】　γδT cell　　Hematopoietic colony formation　　Adoptive immunotherapy 　　γδT细胞作为一种高效的肿瘤杀伤性T淋巴细胞(CTL)，在肿瘤免疫过继治疗中具有潜在的运用价值。我们运用人多发性骨髓瘤细胞株XG-7特异性激发外周血单个核细胞，可在体外扩增获取大量的γδT细胞(109数量以上)达到了过继免疫治疗应用的要求〔1〕。但体内输入大量活化的γδT细胞后,γδT细胞及其分泌成份对机体多系统尤其是造血系统的影响将直接涉及该疗法的疗效和可行性。同时，设想将活化的γδT细胞用于体外骨髓净化、必须阐明其对肿瘤细胞具有特异杀伤作用，而对正常细胞无明显的细胞毒性。目前所运用的LAK、CD3AK、TIL细胞等免疫过继治疗，都观察到效应细胞在杀伤肿瘤细胞的同时，对受者的造血系统会产生一定程度的抑制〔2-4〕。因此，探讨γδT细胞对造血调节功能的影响，在指导γδT细胞免疫过继治疗中有重要意义。为此，本研究运用半固体造血集落培养法初步探讨了γδT细胞及其分泌上清成份对CFU-C形成的影响及其机理。 材料与方法 　　细胞因子及试剂：rhIL-6100ng/ml,GM-CSF 40ng/ml, G-CSF 40ng/ml(均为法国Kelin B博士赠)，IL-1α 10ng/ml (日本Matshima教授赠)，EPO 2000U/ml(上海第二军医大学曹志芳副教授赠)，甲基纤维素(CPS 4000,Shinetsu Chemical Japan)，单克隆抗体CD4,CD8,CD16,CD56,TCR-αβ,TCR-γδ,TiVA(Vγ9),BB3(Vδ2)及羊抗鼠IgG-磁珠二抗(20mg/2ml)购于法国Immu