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- 2020-06-13 发布于湖北
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(三)诱变剂的选择及处理方法
1.诱变剂的选择(高效,简便)
(四)中间培养(CM,培养过夜)
目的:克服表型延迟(分离性延迟)。
表型延迟(phenotypic lag):表型的改变落后于基因型改变的现象
分离性延迟: 突变的基因经DNA复制和细胞分裂后变成纯合状态,表型才能表现出来。
生理性延迟: 由杂合状态变为纯合状态,突变表型仍不能表现出来。如营养缺陷型
(五)突变株的筛选(初筛和复筛)
1.初筛(以量为主)方法需简便、快速
(1)利用形态变异:需预先测定形态与产量的相关性
(2)根据平板颜色反应直接挑选
透明圈法(蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶);
抑菌圈法(抗生素);
变色圈法(柠檬酸)、显色圈(氨基酸);
沉淀圈法(外毒素)
透明圈直径(H)/菌落直径(C):产量高低(初筛指标)
2.复筛(以质为主,定量测定)摇瓶培养法,直接检测所需产物
3.营养缺陷型突变株的筛选
(1)几个概念:三类培养基:
基本培养基(MM, minimal medium)[-]:某野生型能生长的最低成分的组合培养基。
完全培养基(CM,complete medium)[+]:各种营养缺陷型能生长的天然或半组合培养基
补充培养基(SM, supplemental medium)[A]:[-]+A或[B]:[-]+B 相应营养缺陷型能生长的组合或半组合培养基
3种遗传型:
野生型(wil
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