发酵液预处理和过滤.pptVIP

. 加热， 大幅度调节pH值， 加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。 不足之处: 加热法只适合于对热较稳定的目的产物； 极端pH值也会导致某些目的产物失活，且要消耗大量酸碱； 有机溶剂法通常只适用于所处理的液体数量较少的场合。 （2）. 变性法 加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。 在四环素类抗生素中，采用黄血盐和硫酸锌的协同作用生成亚铁氰化锌钾的胶状沉淀来吸附蛋白质； 在枯草杆菌发酵液中，加入氯化钙和磷酸氢二钠，两者生成庞大的凝胶，把蛋白质、菌体及其他不溶性粒子吸附并包裹在其中除去。 （3）. 吸附法 3、固液分离工程 范围：培养基、发酵液、某些中间产品和半成品。其中发酵液由于种类多、粘度大和成分复杂，分离最为困难。 方法：分离筛、重力沉降、浮选分离、离心分离和过滤等，其中用于发酵液固液分离的主要是离心分离和过滤分离。 1.原理：利用转鼓高速转动所产生的离心力，来实现悬浮液、乳浊液的分离或浓缩。 2.优点：分离速率快、分离效率高、液相澄清度好等。 3.缺点：设备投资高、能耗大。此外，连续排料时，固相干度不如过滤设备。 4.种类：种类多，按其作用原理不同，可分为过滤式离心机和沉降式离心机两大类。 3.1 离心分离 5.离心机种类： a. 碟片式离心机 b.管式离心机 C. 倾析式离心机 3.2 过滤 微生物发酵液中含有大量菌体、细胞或 细胞碎片以及残余的固体培养基成分。 过滤就是将悬浮在发酵液中的固体颗粒与液体进行分离的过程。 在过滤操作中，要求滤速快、滤液澄清，并且有高的收率。 过滤（续） 1.原理：悬浮液通过过滤介质时，固态颗粒与溶液分离。 2.类型： 澄清过滤 滤饼过滤 第10章 发酵液预处理和过滤 微生物菌体及残存的固体培养基外，还有未被微生物完全利用的糖类、无机盐、蛋白质，以及微生物的各种代谢产物。 发酵液成分 目的 分离菌体和其他悬浮颗粒，除去部分可溶性杂质和改变滤液的性质，以利于提取和精制后继各工序的顺利进行。 对于胞外产物，经预处理应尽可能使目的产物转移到液相，然后经固液分离除去固相； 对于胞内产物，则应首先收集菌体或细胞，经细胞破碎后，目的产物进入液相，随后再将细胞碎片分离。 方 法 选 择 1 、发酵液过滤特性的改变 2、 发酵液的相对纯化 3、 固液分离工程及设备 主要内容 1 、发酵液过滤特性的改变 ①发酵产物浓度较低，大多为1％一10％，悬浮液中大部分是水； ②悬浮物颗粒小，相对密度与液相相差不大； ③固体粒子可压缩性大； ④液相粘度大，大多为非牛顿型流体； ⑤性质不稳定，随时间变化，如易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解等作用的影响。 这些特性使得发酵液的过滤与分离相当困难。 1.1 微生物发酵液的特性 1.2 改善发酵液过滤特性的物理化学方法 通过对发酵液进行适当的预处理，即可改善其流体性能，降低滤饼比阻，提高过滤与分离的速率。 1. 降低液体粘度： 根据流体力学原理，滤液通过滤饼的速率与液体的粘度成反比，降低液体粘度可有效提高过滤速率。注意加热温度与时间，不影响产物活性和细胞的完整性。 有加水稀释法和加热法 pH值直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷 性质，适当调节pH值可改善其过滤特性。 氨基酸、蛋白质等电点的调节；在膜过滤中，发 酵液中的大分子物质易与膜发生吸附，通过调整pH值 改变易吸附分子的电荷性质，即可减少堵塞和污染； 细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH值下 也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于过滤的进行。 主要有等电点沉淀法 2. 调整pH 采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎 片及溶解大分子物质的分散状态，使其聚结成较 大的颗粒，便于提高过滤速率。另外，还能有效地除去杂蛋白和固体杂质，提高滤液质量。 3. 凝聚与絮凝 助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。悬浮液中大量的细微胶体粒子被吸附到助滤剂的表面上，改变了滤饼结构，降低了过滤阻力。 4. 加入助滤剂 常用的助滤剂 硅藻土、纤维素、石棉粉、白土、炭粒、淀粉等。 最常用的是硅藻土，使用时，通常细粒用量为500 g/m3；中等粒度用量为700 g/m3；粗粒用量为700-1000 g/m3。 加入反应剂和某些可溶性盐类发生反应生成不溶性沉淀，如CaSO4，AlPO4等。生成的沉淀能防止菌丝体粘结，使菌丝具有块状结构，沉淀本身可作为助滤剂，且能使胶状物和悬浮物凝固