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- 2020-06-16 发布于浙江
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电子显微镜样品制备与观察;主要内容;一、样品的取材与固定;(四)实验方法
1 动物麻醉 将小白鼠放入烧杯,放入一蘸有氯仿的脱脂棉球,用培养皿盖住烧杯口,约3~5min后小白鼠被麻醉;
2 解剖分割 迅速解剖,取出肝脏,在硬纸上用新单面刀片分割成0.5*0.5*0.5mm3 小块,迅速投入准备号的固定液;
3 前固定 2.5%戊二醛0~4℃固定1~2h(固定液需提前准备号);
4 漂洗 0.1M磷酸缓冲液漂洗3次,每次5~10min,0~4℃;;5 后固定 1%鋨酸固定1~2h,0~4℃;
6 漂洗 0.1M磷酸缓冲液漂洗3次,每次5~10min,0~4℃;
7 脱水 30???乙醇→ 50%乙醇→ 70%乙醇,0~4℃,每步5~10min;
8 保存 70%乙醇0~4℃保存。;(五)实验要求
1 用具干燥;
2 取材 快、准、小、轻;
3 鋨酸有毒,需在通风厨中进行,含鋨酸的废液放入指定容器;
4 每人固定2~3块样品;
5 在固定的过程中要不断震动样品管。;二、样品的渗透与包埋;(四)实验方法
1 脱水 85%乙醇→ 95%乙醇→ 100%乙醇→ 100%乙醇,每步5~10min;
2 置换 丙酮→丙酮,每步5~10min ;
3 渗透 1/2丙酮+1/2环氧树脂1~4h;
4 包埋 先将包埋模块加满环氧树脂,再将渗透过 的材料用牙签挑到包埋模块尖端部分,并在其
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