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蛋白质印迹缓冲液与母液 RIPA 缓冲液 RIPA 缓冲液含有离子去垢剂脱氧胆酸钠作为活性成分，特别适用于破坏核膜提取细胞核内 物质。 RIPA 缓冲液产生得背景低，但可使激酶变性。它还能破坏蛋白质与蛋白质得相互作 用，因此可能会给免疫沉淀分析与 pull-down 实验带来一些问题。 50 mM Tris HCl ，pH 8 、0 150 mM NaCl 1% NP-40 0 、5% 脱氧胆酸钠 0 、 1% SDS 10% 脱氧胆酸钠母液（ 5 g 脱氧胆酸钠溶于 50 mL 溶液中）避光保存。 NP-40 缓冲液 20 mM Tris HCl ，pH 8 、0 137 mM NaCl 10% 甘油 1% NP-40 2 mM EDTA 细胞骨架结合蛋白提取缓冲液 10 mM Tris ，pH 7 、4 100 mM NaCl 1 mM EDTA 1 mM EGTA 1 mM NaF 4 2 7 20 mM Na P O 2 mM Na 3 VO 4 1% Triton X-100 10% 甘油 0 、 1% SDS 0 、5% 脱氧胆酸盐 可溶蛋白缓冲液 20 mM Tris-HCl ，pH 7 、5 1 mM EGTA （Ca 2+ 螯合剂） 制备原钒酸钠 所有流程必须在通风橱中进行。 1 、 用双蒸水制备 100 mM 原钒酸钠溶液 2 、 用 HCl 将 pH 调节至 9 、 0 3 、 煮沸至无色 4 、 冷却至室温 5 、 再次将 pH 调节至 9 、0 6 、 再次煮沸至无色 7 、 重复以上循环，直到煮沸并冷却溶液之后得 pH 保持 9 、0 8 、 用水补至初始体积 9 、 分装之后保存于 -20 ℃ 10 、 如果样品变黄，丢弃样品 避免煮沸期间体积变化过大，可用盖子稍微盖住容器上方，减少蒸发。 TBS 10 × （浓缩 Tris 缓冲盐溶液） 1 L 溶液： 24 g Tris 碱（式量： 121 、 1 g ） 88 g NaCl （式量：58 、4 g ） 溶于 900 mL 蒸馏水中 用 12 N HCl 将 pH 调节至 7 、6 加入蒸馏水至终体积为 1 L 要制备 1× 溶液，将 1 份 10× 溶液与 9 份蒸馏水混合，并再次将 pH 调节至 7 、6。1× 溶液得最终摩尔浓度为 20 mM Tris 与 150 mM NaCl 。 Tris 缓冲液得替代配方同时含有 Tris 碱与 Tris-HCl 。这可避免大量使用具有潜在危险性得盐 酸来中与单独得 Tris 碱。 TBS 10 × 替代配方（浓缩 Tris 缓冲盐溶液） 1 L 溶液： 24 g Tris-HCl （式量：157 、6 g ） 5 、6 g Tris 碱（式量： 121 、1 g ） 88 g NaCl （式量：58 、4 g ） 溶于 900 mL 蒸馏水中 1 、 在室温下将溶液 pH 调节至约 7 、6 。如果溶液过碱，用浓 HCl 将 pH 调节至 7 、6 ；如果溶液过酸，用浓 NaOH 将 pH 调节至 7、 6 。 2 、 加入蒸馏水至终体积为 1 L 。 3 、 要制备 1 ×溶液， 将 1 份 10 ×溶液与 9 份蒸馏水混合， 并再次将 pH 调节至 7 、6 。 4 、 1 ×溶液得最终摩尔浓度为 20 mM Tris 与 150 mM NaCl 。 TBST （Tris 缓冲盐溶液， 0、1% Tween 20 ） 1 L 溶液： 100 mL TBS 10 × 900 mL 蒸馏水 1 mL T