叶绿素提取和分离试验的几种方法.docVIP

我们以灯芯柱纸层析法为基础,进行该实验,取得了较好的效果,现介绍如下。 具体的方法是:1取洗净、揩干的天竺葵叶片5g剪碎,加85%丙酮5ml研成匀浆;o取滤纸一张剪成2.5cm×5.5cm的长方形,从一端开始卷起,卷成柱状,卷时将两边对齐,捻紧备用;?将纸芯插入滤纸中央并立放于培养皿上,培养皿内装有四氯化碳(不用汽油),纸芯下端浸入四氯化碳中;?用尖镊夹取研好的色素匀浆均匀堆于纸芯周围,盖上皿盖,静置观察。15min左右色素可充分扩展,分离结束。此实验方法具有以下特点:1克服了提取液中色素量少的缺点,层析后,4种色素在滤纸上形成清晰可见的4个同心圆。其分布由外及里依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色);o分离速度的快慢与纸芯的粗细相关。纸芯捻得越细越实,其分离速度越慢,反之则快,由此可对分离的速度加以控制;?分离的叶绿素a的色带宽度可达0.3～0.5cm,且与叶绿素b的色带之间有约1mm的分界。因此能够提高叶绿素a和叶绿素b提取的纯度和浓度。 　 提取色素　为了得到墨绿色的色素滤液,于实验前2～3天,取质地柔软、深绿色的草本植物的叶片放在通风处阴干。研磨时,所取叶片要除去粗的叶脉和叶柄。向研钵中加入少量二氧化硅和碳酸钙,进行研磨。待研磨充分后,再加入少量氯化钠和适量丙酮,就出现了深绿色的液体,液体经脱脂棉过滤后就得到了墨绿色的色素滤液。 2