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分子医学技能实验 袁 洁 生物化学教研室 实验一 口腔粘膜细胞基因组 DNA 制备 ? 基因组 DNA 的提取通常用于构建基因组文库、 Southern 杂交（包括 RFLP ）及 PCR 分离基因等。 ? 是一般的基因工程实验中 DNA 操作的最初步骤。 一、基因组 DNA 的提取与纯化 目的： 二、人基因组 DNA 的制备 ? 实验目的及意义： ? 从人口腔上皮细胞中提取纯的基因 组 DNA ? 掌握基因组 DNA 抽提的方法，理解 核酸分离纯化的基本原理 分离纯化基因组 DNA 的常用方法： 不同生物（植物、动物、微生物）的基因组 DNA 的提取方法有所不同，分离方法也有差异。 主要根据不同细胞的特点而有区别，但原理相似， 因此它们有共同的步骤： ? 裂解细胞 ： SDS 裂解细胞， EDTA 抑制核酸酶 ? 除去蛋白质 ：蛋白酶 K 水解蛋白质，酚和氯仿 / 异 戊醇抽提、分离蛋白质； ? 析出 DNA ：乙醇沉淀使 DNA 从溶液中析出。 细胞样品的核酸提取的主要步骤 ? 破碎细胞 ? 去除细胞内的其它分子： ? 蛋白质 ? 多糖 ? 脂类 ? 去除盐类、有机溶剂等杂质 实验材