基因分析的基本策略课件.pptxVIP

70年代以来，与DNA、RNA操作相关的各种分子生物学技术不断发展，到目前已经形成了一个庞大而复杂的技术体系。基因操作已成为医学研究的重要手段。简单地说，基因操作就是所有涉及到DNA、RNA操作的技术。 本章主要讨论如何对基因进行定性、定量分析；在随后的2章里分别介绍基因功能研究的技术和基因工程的有关内容。;1、需要进行基因的DNA序列分析:序列测定 2、基因的染色体上定位：原位杂交技术 3、研究基因在基因组中的拷贝数：Southern Blot 4、研究基因表达水平：Northern Blot、逆转录实时PCR技术 5、研究基因表达产物的水平：Western Blot、流式细胞仪（ FACS ）;第一节 利用DNA定性、定量分析可从不同角度对基因和基因组进行研究;1968年华裔生物化学、生物学家吴瑞博士（Dr．Ray Wu） 独创性地设计出一种崭新的引物一延伸测序策略，并于1971年首次成功地测定了λ噬菌体两个COS末端的完整序列； 1977，F.Sanger在该策略的基础上，发展出了快速测定DNA序列的末端中止法； K.Mullis采纳他的方法，完善了PCR扩增DNA的方法； M.Smith发明了碱基定点突变技术。这三位科学家全都获得了诺贝尔奖。;Sanger双脱氧链终止法引入了双脱氧核苷三磷酸（2ˊ,3ˊ-ddNTP）作为链终止剂。