第13章 临床即时检验仪器与技术.pptVIP

二、血气分析仪 （二）基于荧光传感器的POCT血气分析仪 3.影响因素 ①试剂片：应按照不同仪器的使用要求储存试剂片。 ②温度：定标液对温度敏感，使用前应放置在室温下平衡。 ③样品的全自动吸入和封闭测量：外力加压注入样品会不同程度地造成细胞破裂及内部压力变化，对检测结果造成一定影响。 4.质量控制 ①实时监测大气压； ②检测前应对标准气体或液体定标。 三、POCT免疫分析仪 （一）基于免疫金标记技术的POCT免疫分析仪 1.基于免疫渗滤技术的POCT仪 （1）工作原理： 免疫渗滤技术是利用微孔滤膜的可滤过性，以硝酸纤维素膜为载体，在包被了抗原或抗体的特殊渗滤装置上，使反应和洗涤以通过液体滤过膜的方式迅速完成。其中应用最为广泛的是斑点金免疫渗滤试验。 斑点金免疫渗滤试验是在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中，依次滴加样本、免疫金和洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上，故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用，达到快速检测目的。阳性反应在膜上呈现红色斑点。 三、POCT免疫分析仪 （一）基于免疫金标记技术的POCT免疫分析仪 1.基于免疫渗滤技术的POCT仪 （2）基本结构 斑点金免疫渗滤试验的试剂盒由渗滤装置、胶体金标记抗体、封闭液和洗涤液组成。 渗滤装置由塑料小盒、吸水垫料和点加了抗原或抗体的硝酸纤维素膜片三部分组成。 （3）影响因素：①特异性抗体（一抗）或抗原、待检样本和金标抗体的用量事先都必须应用方阵法确定最适用量。②盒底充填的垫料吸水性要强，否则影响结果。 三、POCT免疫分析仪 （一）基于免疫金标记技术的POCT免疫分析仪 2.基于免疫层析技术的POCT仪 （1）工作原理： 三、POCT免疫分析仪 （一）基于免疫金标记技术的POCT免疫分析仪 2.基于免疫层析技术的POCT仪 （2）基本结构： 金标定量免疫分析仪通常包括：反射型光纤传感器、光探测器、单片微电脑、输入输出接口、模数转换器、扫描控制电路、光电转换电路、背景补偿电路、显示器和内置打印机等。 （3）影响因素： 测量环境的光照、温度和湿度等物理条件均会对检测结果产生干扰；由于操作导致测试区反应颜色不均匀，可使检测结果偏高。 三、POCT免疫分析仪 （一）基于免疫金标记技术的POCT免疫分析仪 3.质量控制 （1）胶体金质量对快速试验的质量至关重要。 （2）硝酸纤维素膜是胶体金免疫层析反应的载体，其孔径的大小、质量的好坏和层析膜的化学处理优劣都会影响包被抗原或抗体的吸附量，从而影响检测结果。 （3）免疫胶体金快速检测是通过标记的胶体金而显示反应条带，判读主观性很大，有时会存在难以判定的情况（如色带模糊时）。因此，针对胶体免疫层析试验的影响因素，建立完善的质量控制体系，包括试剂灵敏度与稳定性、临界值的确定、层析条间的重复性、室内质量控制以及人员培训等，对保证检验质量至关重要。 三、POCT免疫分析仪 （二）基于免疫荧光技术的POCT免疫分析仪 1.检测原理 由微孔层析和免疫荧光技术相结合的技术平台（免疫荧光层析技术）。 样品加入加样孔后，过滤掉血细胞和其他颗粒成分，反应区域含有荧光素标记的抗体或抗原和待测物质结合，产生反应而显色。 仪器的测定系统对荧光信号进行测量，并对特异的待测物进行定量分析，结合仪器中反应密码芯片中的标准曲线计算出样品中待测物的浓度。 2.基本结构 由荧光检测器和检测板组成。 第13章 临床即时检验仪器与技术 目 录 第一节 即时检验的技术原理与特点 第二节 常用即时检验仪器 第三节 即时检验仪器的应用 第四节 即时检验存在的问题 重点提示 1.即时检验的定义和主要特点是什么？有哪些临床应用？ 2.即时检验的主要技术大致可分为哪几类？ 3.POCT血糖测定仪的检测原理和基本结构是什么？。 4.POCT血气分析仪的检测原理和基本结构是什么？ 5.POCT免疫分析仪的检测原理和基本结构是什么？ 6.简述微流控芯片技术在POCT仪器中的应用。 第一节 即时检验的技术原理与特点 一、POCT的概念 POCT是指在实验室外，靠近检测对象，采用便携式、可移动的微型检测仪器和试剂，快速及时报告检测结果，并能对检测结果及时反馈和干预的体外检验系统。 美国国家临床生化科学院（National Academy of Clinical Biochemistry，ACB）将POCT的概念定义为：“在接近患者治疗处，由未接受临床检验学科训练的临床人员或者患者（自我检测）进行的临床检验，是在传统、核心或中心实验室以外进行的一切检验。” 空间上，在患者现场进行的检验，即“床旁检验”；时间上，在患者发病的时刻进行的检验，即“即时检验”。 一、POCT的概念 POCT曾有过许多意思相近的表述，如患者近旁检测、床旁